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不同固定液对体外细胞系荧光蛋白淬灭及对胞内蛋白荧光染色的影响
不同固定液对体外细胞系荧光蛋白淬灭及对胞内蛋白荧光染色的影响
作者:
姚茜
孙丽纳
林国豪
王昊
蒋旭
谢莹
韦正波
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
荧光蛋白
猝灭
免疫荧光
固定方法
摘要:
目的:比较不同细胞固定液对荧光蛋白淬灭情况以及核内、胞浆蛋白免疫荧光染色的影响.方法:分别对融合了RFP和GFP基因的鼻咽癌HK1细胞采用95%乙醇、75%乙醇、甲醇、丙酮∶甲醇=1∶1、5%冰乙酸、Camoy固定液进行固定,然后采用免疫荧光法对细胞进行免疫染色.结果:六种固定液均能使荧光蛋白猝灭.免疫荧光染色方面,对于核蛋白染色,75%乙醇、95%乙醇、丙酮∶甲醇=1∶1、Carnoy固定液固定后核区获得明显的荧光染色,而采用甲醇、5%冰乙酸固定后荧光染色不明显.对于胞质蛋白染色,按荧光染色的清晰程度分为固定于Carnoy固定液>丙酮∶甲醇=1∶1>甲醇>5%冰乙酸>75%乙醇>95%乙醇,前四者固定可见分布于胞质,75%乙醇或95%乙醇固定的目标蛋白定位不清.结论:六种不同的固定液在有效失活荧光蛋白的情况下对核蛋白及胞浆蛋白抗原性的影响略有不同,可根据研究目的蛋白表达的部位及特点来选用合适的固定液.
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文献信息
篇名
不同固定液对体外细胞系荧光蛋白淬灭及对胞内蛋白荧光染色的影响
来源期刊
现代生物医学进展
学科
医学
关键词
荧光蛋白
猝灭
免疫荧光
固定方法
年,卷(期)
2019,(11)
所属期刊栏目
基础研究
研究方向
页码范围
2072-2075,2050
页数
5页
分类号
R-33|R739.6
字数
语种
中文
DOI
10.13241/j.cnki.pmb.2019.11.014
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
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1
谢莹
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韦正波
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3
姚茜
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王昊
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荧光蛋白
猝灭
免疫荧光
固定方法
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
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期刊影响力
现代生物医学进展
主办单位:
黑龙江省森工总医院
哈尔滨医科大学附属第四医院
出版周期:
旬刊
ISSN:
1673-6273
CN:
23-1544/R
开本:
16开
出版地:
黑龙江省哈尔滨市和兴路32号
邮发代号:
14-12
创刊时间:
2001
语种:
chi
出版文献量(篇)
22114
总下载数(次)
63
总被引数(次)
99951
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