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摘要:
目的:探讨过表达miR-21通过PTEN/PI3K/AKT通路对人退变髓核细胞自噬的影响.方法:构建稳定过表达miR-21 mimic人退变髓核细胞,转染无意义序列作为miR-21 mimic control组,采用RT-qPCR检测转染效率;利用MDC荧光染色法观察细胞自噬泡;Western-Blot检测细胞自噬相关蛋白LC3和P62的表达以及PTEN/PI3K/AKT信号通路中关键蛋白PTEN、PI3K及AKT的表达水平.结果:RT-qPCR结果表明miR-21 mimic转染成功且效率较高,与miR-21 mimic control组及空白细胞对照组相比,差异显著(P<0.05).荧光显微镜观察MDC染色情况,miR-21 mimic组的细胞中几乎没有发现自噬体,而miR-21 mimic control组以及空白对照组细胞中自噬体均较多,与前者相比差异均明显,具有统计学意义(P<0.05).miR-21 mimic组细胞中LC3-Ⅱ/LC3-I表达量的比值均显著低于miR-21 mimic control组及空白对照组细胞(P.<0.05);而P62在miR-21 mimic组细胞中表达量显著高于miR-21 mimic control组及空白细胞对照组,具有统计学意义(P<0.05).miR-21 mimic组中PTEN蛋白的表达水平较低,与另外两组相比具有统计学意义(P.<0.05);磷酸化的PI3K(p-PI3K)和AKT(p-Akt)在miR-21 mimic组中均明显高于miR-21 mimic control组和空白细胞对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:miR-21可以通过靶向沉默PTEN,促进PI3K和AKT发生磷酸化,进而使PTEN/PI3K/AKT信号通路被激活,最终抑制人椎间盘退变髓核细胞的自噬.
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文献信息
篇名 过表达MicroRNA-21通过PTEN/PI3K/AKT信号通路调控人退变髓核细胞自噬的研究
来源期刊 现代生物医学进展 学科 医学
关键词 miR-21 椎间盘退变髓核细胞 PTEN/PI3K/AKT 细胞自噬
年,卷(期) 2019,(14) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 2626-2631
页数 6页 分类号 R-33|R681.53
字数 语种 中文
DOI 10.13241/j.cnki.pmb.2019.14.005
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 李俊琴 5 1 1.0 1.0
2 王哲 12 30 4.0 4.0
3 赵四平 5 5 1.0 2.0
4 潘东晟 2 0 0.0 0.0
5 张永峰 2 0 0.0 0.0
6 吕艳红 2 0 0.0 0.0
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miR-21
椎间盘退变髓核细胞
PTEN/PI3K/AKT
细胞自噬
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现代生物医学进展
旬刊
1673-6273
23-1544/R
16开
黑龙江省哈尔滨市和兴路32号
14-12
2001
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