杂合木聚糖酶的设计及在毕赤酵母中的表达

• 作者: 何优 周晨妍 张枫凯 田艳杰 蔡刘滕子 邵天赐
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 木聚糖酶 糖基化 二硫键 芳香族氨基酸 疏水性氨基酸 合成生物学
• 年，卷（期）: 2019,（19）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 58-62
• 页数: 5页
• 字数: 3621字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.021208

摘要

人工设计合成木聚糖酶,为木聚糖酶分子改造研究提供新思路.采用合成生物学思路,以黑曲霉XZ-3S木聚糖酶XynZF-2基因序列为基础,将N端48个氨基酸替换成EvXyn11 N端的34个氨基酸;引入芳香族氨基酸P9Y和H14F;在C端引入二硫键Cys38-Cys191;α-螺旋及cord区域分别引入疏水性氨基酸K164M、G166A、N160I、V111A以及G109A,设计杂合酶XynZL.基因全合成后,构建毕赤酵母重组表达质粒pPIC9K-ZL,将其转化酵母菌GS115,对工程菌GS115-XynZL进行单因素发酵条件优化及重组酶酶学性质测定.最佳发酵培养基为土豆培养基,最佳诱导温度为28℃,最佳种龄为20 h,最佳诱导时间为168 h,最佳诱导起始pH值为6.5,甲醇诱导最佳体积分数为15 mL/L.重组酶酶学性质显示:最佳反应温度为55℃,最适pH值为5.0,杂合酶XynZL在毕赤酵母中表达后具有特定性质和功能,其设计方法拓宽了木聚糖酶分子改造研究的思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵天赐	新乡医学院生命科学技术学院河南省合成生物学工程实验室	1	0	0.0	0.0
2	何优	新乡医学院生命科学技术学院河南省合成生物学工程实验室	1	0	0.0	0.0
3	张枫凯	新乡医学院生命科学技术学院河南省合成生物学工程实验室	1	0	0.0	0.0
4	蔡刘滕子	新乡医学院生命科学技术学院河南省合成生物学工程实验室	1	0	0.0	0.0
5	田艳杰	新乡医学院生命科学技术学院河南省合成生物学工程实验室	1	0	0.0	0.0