糖皮质激素广谱特异性单克隆抗体的制备及其ic-ELISA方法的建立

• 作者: 劳翠瑜 姚添淇 张世伟 王士峰 胡桂平
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 医学
• 关键词: 糖皮质激素 同源策略 异源策略 广谱特异性 间接竞争酶联免疫吸附(ic-ELISA)法
• 年，卷（期）: 2019,（14）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 186-191
• 页数: 6页
• 分类号: R446.61
• 字数: 4760字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-20180724-290

摘要

将氢化可的松半抗原HYD通过活化脂法与钥孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联获得氢化可的松完整抗原KLH-HYD,并对小鼠肌肉注射此抗原,使小鼠免疫;通过杂交瘤技术获得1株能够稳定分泌氢化可的松的单克隆抗体细胞株HYD-C1,并通过腹水制备大量抗体.将氢化可的松半抗原HYD和地塞米松半抗原DEX通过活化脂法分别与卵清蛋白(ovalbumin,OVA)偶联作为包被原,建立糖皮质激素的间接竞争酶联免疫吸附检测(indirect competitive-enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA)方法.结果:在同源包被情况下氢化可的松灵敏度为1.63 ng/mL,异源包被情况下灵敏度为0.24 ng/mL;在交叉抑制实验中,异源策略中的各糖皮质激素灵敏度均高于同源策略中的结果,异源策略条件下很好地覆盖了本研究中所检测的糖皮质激素,使该抗体具备良好的广谱特异性.在异源策略添加回收实验中平均添加回收率在77.5％～111.3％之间,落在合理范围内,满足检测需求.结论:成功制备出氢化可的松单克隆抗体,建立了同源和异源策略糖皮质激素检测方法,结果发现异源策略中糖皮质激素的灵敏度高于同源策略,并使该方法具有更好的广谱特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张世伟	广东省深圳市计量质量检测研究院国家营养食品质量监督检验中心	3	8	2.0	2.0
2	姚添淇	广东省深圳市计量质量检测研究院国家营养食品质量监督检验中心	1	0	0.0	0.0
3	劳翠瑜	广东省深圳市计量质量检测研究院国家营养食品质量监督检验中心	1	0	0.0	0.0
4	王士峰	广东省深圳市计量质量检测研究院国家营养食品质量监督检验中心	1	0	0.0	0.0
5	胡桂平	广东省深圳市计量质量检测研究院国家营养食品质量监督检验中心	1	0	0.0	0.0