马铃薯晚疫病菌RxLR效应因子RD24基因克隆及其PVX表达载体构建与鉴定

• 作者: 吕典秋 孙少慧 张静华 杨帅 王晓丹 金光辉 闵凡祥 马纪 高云飞
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 载体构建 基因克隆 效应因子 植物病毒表达载体
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 植物保护·农药
• 页码范围: 144-149
• 页数: 6页
• 分类号: S.532
• 语种: 中文

摘要

马铃薯晚疫病病原菌致病疫霉菌(Phytophthora infestans)在侵入寄主细胞的同时分泌效应因子(Effector),该类蛋白在晚疫病致病过程中发挥着关键作用,是抑制植物免疫的重要因素.PITG RD24是马铃薯晚疫病菌位于细胞核核的一个重要效应因子.为了快速鉴定效应因子RD24在马铃薯中瞬时表达的状况及抗性情况,构建效应子RD24的PVX表达载体是十分必要的.本研究利用PCR、酶切、分子克隆等生物学技术,将RD24片段连接插入至PVX (pGR106)栽体中,然后用热击法将连接产物转化至大肠杆菌DH10B感受态细胞中.通过PCR筛选、质粒提取、测序比对,结果表明成功获得含有目的表达载体pGR106· RD24的质粒,可为下一步筛选马铃薯广谱抗病基因研究提供必备载体.