脱乙酰基酶在枯草芽孢杆菌中的高效可溶性表达

• 作者: 曹成浩 王远山 薛亚平 龚美华
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 脱乙酰基酶 可溶性表达 枯草芽孢杆菌 过量表达
• 年，卷（期）: 2019,（17）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 7-13,19
• 页数: 8页
• 字数: 6071字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.021023

摘要

为提高脱乙酰基酶的可溶性表达含量,对前期挖掘的脱乙酰基酶NAP-Das2.3基因进行异源表达及发酵优化.将脱乙酰基酶NAP-Das2.3基因克隆至枯草芽孢杆菌表达载体pP43NMK的nprB信号肽下游,转入B.subtilis WB800构建了重组工程菌B.subtilis WB800/pP43NMK/nap-das2.3,并对重组菌培养及发酵产酶条件进行了优化.重组菌最适培养和产酶条件分别为甘油6 g/L、牛肉膏30 g/L、NaCl 10 g/L;pH 7.5、培养温度37℃、装液量100 mL(500 mL摇瓶)、培养30 h.在优化的条件下,发酵液中脱乙酰基酶酶活达到106.42 U/L,较出发条件提高了424.68倍,在5L发酵罐培养30 h后,脱乙酰基酶酶活达到116.13 U/L.研究实现了脱乙酰基酶的异源高效可溶性表达,为脱乙酰基酶的应用提供了基础.