多点突变提高α-L-鼠李糖苷酶热稳定性

• 作者: 刘嘉男 刘小琴 吴喆瑜 巩建业 廖辉 李利君 李文静 杨岩
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: α-L-鼠李糖苷酶 联合突变 热稳定性
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 23-29
• 页数: 7页
• 字数: 5913字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.018703

摘要

为了提高α-L-鼠李糖苷酶的热稳定性,对实验室前期构建的K406R、K440R、K573V、E631F四个不同氨基酸位点的单点突变体进行联合突变,得到了K406R-K573V、K406R-E631F、K440R-K573V、K440R-E631F四个联合突变体.结果表明,相比于野生型(wild type,WT),联合突变体K440R-K573V和K440R-E631F的热稳定性有所提高,在60℃时半衰期分别提高了1.13倍,1.44倍;在65℃的半衰期分别提高了1.64倍,1.64倍;在70℃的半衰期分别提高了1.88倍,1.68倍.对突变体K440R-E631F进行圆二色谱分析、分子动力学以及分析微观结构变化分析可知,K440R-E631F突变体与WT相比,内部疏水性有所提高,二级结构中α-螺旋、β-转角、无规则卷曲含量增多,可能与热稳定性的提高相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李文静	集美大学食品与生物工程学院	18	105	6.0	10.0
2	李利君	集美大学食品与生物工程学院	49	232	9.0	12.0
3	吴喆瑜	集美大学食品与生物工程学院	5	7	1.0	2.0
4	巩建业	集美大学食品与生物工程学院	7	0	0.0	0.0
5	刘小琴	集美大学食品与生物工程学院	3	0	0.0	0.0
6	杨岩	集美大学食品与生物工程学院	2	7	1.0	2.0
7	刘嘉男	集美大学食品与生物工程学院	3	0	0.0	0.0
8	廖辉	集美大学食品与生物工程学院	3	0	0.0	0.0