以慢病毒为载体的人骨肉瘤细胞肾上腺髓质素RNA干扰体系的构建

• 作者: 周晓玲 姚璐 尹战海 戴星 杨康平 杨益民 马巍
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰体系 肾上腺髓质素 慢病毒载体 骨肉瘤细胞
• 年，卷（期）: 2019,（33）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: R738.1
• 字数: 4039字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2019.33.001

摘要

目的 以人骨肉瘤细胞的肾上腺髓质素(ADM)为作用靶点,建立以慢病毒为载体的RNA干扰体系,以高效抑制ADM基因的表达.方法 构建慢病毒载体,设计3条针对ADM基因序列的shRNA序列(shRNA-1、2、3),靶向ADM shRNA与慢病毒载体连接后,挑选LV-ADM-shRNA阳性克隆进行PCR鉴定并测序.经测序确认寡核苷酸插入部位正确后,提取目的质粒LV-ADM-shRNA 1、2、3,在293T细胞中包装携带目的质粒的慢病毒,然后采用多孔稀释法测定慢病毒滴度.结果 构建3条靶向ADM的LV-shRNA慢病毒载体,并获得较高滴度的慢病毒颗粒.结论 成功建立以慢病毒为载体的人骨肉瘤细胞ADM RNA干扰体系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马巍		60	322	9.0	16.0
2	杨康平		23	74	4.0	8.0
3	尹战海		37	322	11.0	17.0
4	杨益民		50	264	9.0	14.0
5	周晓玲		19	161	8.0	12.0
6	戴星		10	10	2.0	3.0
7	姚璐	西安交通大学医学部基础医学院	9	45	3.0	6.0