泼尼松龙可抑制转化生长因子β激活激酶1诱导的成骨细胞凋亡

• 作者: 任守忠 刘日升 张蕾 张雯
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 转化生长因子β激活激酶1 泼尼松龙 成骨细胞 细胞凋亡 JNK信号通路 TAK1 基因沉默
• 年，卷（期）: 2019,（23）
• 所属期刊栏目: 骨组织构建
• 页码范围: 3630-3635
• 页数: 6页
• 分类号: R446
• 字数: 7469字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.1306

摘要

背景:研究显示转化生长因子β激活激酶1(transforming growth factor beta activated kinase 1,TAK1)在骨、关节的发育以及骨形态信号转导中发挥着重要作用,与骨关节炎的发生也存在一定的相关性.目的:探究泼尼松龙通过抑制TAK1表达对诱导成骨细胞凋亡的影响.方法:将M3T3-E1成骨细胞经原代培养后传代培养.取第3代细胞分为3组,正常细胞组(对照组)、阴性转染+泼尼松龙组、TAK1 siRNA转染+泼尼松龙组.采用碱性磷酸酶染色和钙结节染色评估成骨细胞分化能力的变化;采用免疫印迹法(Western blot)检测细胞内磷酸化(p)-TAK1、TAK1、磷酸化c-jun氨基末端激酶(p-JNK)、JNK蛋白表达,MTT法检测M3T3-E1细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞周期以及细胞凋亡变化.结果与结论:①TAK1 siRNA转染+泼尼松龙组细胞的碱性磷酸酶红染程度较少,阴性转染+泼尼松龙组次之,正常细胞组碱性磷酸酶染色最多;钙结节染色显示与正常细胞组相比,阴性转染+泼尼松龙组钙结节数量明显减少,TAK1 siRNA转染+泼尼松龙组结节数量最少;②荧光显微镜显示,阴性转染+泼尼松龙组细胞出现破碎,形态发生改变,TAK1 siRNA转染+泼尼松龙组破碎细胞数量明显增加;③Western Blot显示,3组间p-TAK1、p-JNK蛋白表达量逐渐降低(P<0.05);④MTT检测显示,3组间TAK1 siRNA转染+泼尼松龙组细胞增殖抑制率最高(P<0.05);在12-48 h随着时间的延长,细胞增殖抑制率呈逐渐上升趋势,在72 h时开始下降;⑤流式细胞仪检测结果显示,TAK1 siRNA转染+泼尼松龙组G2期细胞比例高于其他2组,S期细胞比例显著低于其他2组(P<0.05);⑥TAK1 siRNA转染+泼尼松龙组细胞凋亡率明显高于正常细胞组、阴性转染+泼尼松龙组(P<0.05);⑦结果说明,沉默TAK1表达后能够增强泼尼松龙诱导成骨细胞凋亡的作用,可能与JNK信号通路相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任守忠		26	230	8.0	14.0
2	张雯		6	8	2.0	2.0
3	张蕾		3	6	2.0	2.0
4	刘日升		3	2	1.0	1.0