黑曲霉酸性果胶裂解酶的高效表达及其在果汁澄清中的应用

• 作者: 何玉兰 潘力 王斌
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 酸性果胶裂解酶 黑曲霉 高效表达 酶学性质 果汁澄清
• 年，卷（期）: 2019,（18）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 83-88
• 页数: 6页
• 分类号: TQ925
• 字数: 4549字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-20181005-024

摘要

利用黑曲霉自身强启动子(葡萄糖淀粉酶启动子,PglaA)实现了酸性果胶裂解酶PelD在黑曲霉中的过量表达,重组酸性果胶裂解酶经镍柱亲和层析纯化后进行Western blot鉴定及酶学性质研究.重组酸性果胶裂解酶在摇瓶发酵条件下最高酶活力达到8822.6 U/mL;经一步纯化后,该重组酶的比活力为8522.7 U/mg,回收率为79.4％;该重组酶的最适反应pH值为5.0,在pH 3.0～6.5范围内40℃保温2 h仍能保持50％以上的相对酶活力,在酸性pH值下稳定性良好;最适反应温度为50℃,该重组酶在30～50℃的范围内非常稳定;在1 mmol/L浓度下,Ca2+、Mg2+、Cu2+、Zn2+、Ni2+、Mn2+、Ba2+对该重组酶具有激活作用,其中Zn2+、Ni2+、Ba2+激活作用较为显著,而十二烷基硫酸钠表现为抑制作用;底物特异性分析表明该酶能够特异性地降解高度甲酯化果胶,其对柑橘果胶(酯化度≥85％)酶活力高达31248.0 U/mL;此外,重组酶对橙汁、苹果汁和葡萄汁具有良好的澄清效果,其中橙汁的透光度提高了16.9倍,苹果汁的透光度提高了10.5倍,葡萄汁的透光度提高了4.7倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘力	华南理工大学生物科学与工程学院	71	587	16.0	20.0
3	王斌	华南理工大学生物科学与工程学院	54	380	12.0	18.0
9	何玉兰	华南理工大学生物科学与工程学院	1	0	0.0	0.0