菊粉外切酶的异源表达、纯化及酶学性质

• 作者: 唐文竹 安启坤 马俊
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 类芽孢杆菌 菊粉外切酶 克隆 酶学性质
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 25-30
• 页数: 6页
• 字数: 4355字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.018537

摘要

将菊粉降解菌Paenibacillus sp.Lfos16的菊粉外切酶基因克隆至表达载体pET-28a(+),转入Escherichia.coli BL21(DE3)中实现了异源表达.利用镍柱亲和层析纯化重组菊粉外切酶,并进行SDS-PAGE检测.重组菊粉外切酶的表观分子质量为87 kDa,经纯化后,重组菊粉外切酶的比酶活为348.30 U/mg.重组菊粉外切酶作用菊粉和蔗糖的酶活分别为259.37 U/mL和592.16 U/mL,I/S值为0.438,且重组酶水解菊粉的主要产物为果糖.重组菊粉外切酶最适作用温度为40℃,且当温度低于30℃时酶活较稳定;最适作用pH为6.Ag+、\u2、Mn2+、Zn2+、Hg2+、Fe3+具有显著抑制作用.重组菊粉外切酶对菊粉的Km为19.28 mg/mL,Vmax为0.18 mg/(min·mL).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	安启坤	大连工业大学生物工程学院	2	6	1.0	2.0
2	唐文竹	大连工业大学生物工程学院	17	33	4.0	5.0
3	马俊	大连工业大学生物工程学院	5	2	1.0	1.0