摘要:
目的 观察子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)患者异位子宫内膜组织转化生长因子β1(Transforming Growth Factor beta1,TGF-β1)mRNA的表达变化,观察加入TGF-β1及其抑制剂培养的子宫内膜间质细胞(endome-trial stromal cells,ESCs)增殖、侵袭能力变化,并探讨可能作用机制.方法 100例EMs患者的异位子宫内膜组织及40例未患有EMs患者的正常子宫内膜组织,采用qRT-PCR法检测TGF-β1 mRNA.取异位子宫内膜新鲜组织,分离、培养、鉴定原代ESCs;取对数生长期ESCs分为1、2、3、4组,1、2组分别加入终浓度为2 ng/mL的TGF-β1因子、4μL PBS(TGF-β1因子配制溶剂),3、4组分别加入终浓度为1μmol/L的TGF-β1抑制剂Ly364947、2μL DMSO(Ly364947配制溶剂),培养48 h时采用qRT-PCR法检测各组细胞TGF-β1 mRNA,分别于培养0、24、48、72 h时采用MTS法测算各组细胞增殖能力(OD值表示),培养48 h时采用Boyden实验观察各组细胞侵袭能力,培养48 h时采用Western blotting法检测各组细胞β-连环蛋白(β-catenin)、cMYC蛋白.结果 EMs患者异位子宫内膜组织、正常子宫内膜组织TGF-β1 mRNA相对表达量分别为2.26±0.96、1.02±0.38(t=7.908,P<0.05).培养48 h时1、2组细胞TGF-β1 mRNA相对表达量分别为8.88±1.03、1.00±0.02(P<0.05),3、4组细胞TGF-β1 mRNA相对表达量分别为0.57±0.07、1.00±0.04(P<0.05);与2组比较,培养48、72 h时1组细胞OD值升高(P均<0.05),与4组比较,培养48、72 h时3组细胞OD值降低(P均<0.05);培养48 h时1、2组细胞穿膜数分别为73.98±10.32、50.67±8.94(P<0.05),3、4组细胞穿膜数分别为28.04±7.99、53.17±10.52(P<0.05);培养48 h时,与2组比较,1组细胞β-catenin、cMYC相对表达量增加(P<0.05),与4组比较,3组细胞β-catenin、cMYC相对表达量降低(P<0.05).结论 EMs患者异位子宫内膜组织TGF-β1 mRNA表达升高.加入TGF-β1的ESCs细胞增殖、侵袭能力增加,β-catenin、cMYC蛋白表达升高;加入TGF-β1抑制剂的的ESCs细胞增殖、侵袭能力降低,β-catenin、cMYC蛋白表达降低.TGF-β1可能通过促进β-catenin、cMYC蛋白的表达,激活wnt/β-catenin信号通路,促进ESCs的增殖、侵袭.