构建环状RNA mmu_circ_Rab11a质粒载体并转染293T细胞

• 作者: 元佩燕 徐帅妹 徐平平 童方丽 陈蕾
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 环状RNA mmu_circ_Rab11a 载体构建 293T细胞 脂质体转染 过表达载体 MC3T3细胞 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2019,（33）
• 所属期刊栏目: 细胞相关基础实验
• 页码范围: 5372-5377
• 页数: 6页
• 分类号: R459.9|R394.2|Q78
• 字数: 6660字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.1822

摘要

背景:研究发现Rab11a在细胞自噬、增殖过程中发挥重要作用.由于circRNA可通过调控亲本基因的表达参与生物学过程的调控,因此,mmu_circ_Rab11a是否同样在细胞自噬、增殖过程中发挥重要作用值得关注.目的:探讨环状RNA mmu_circ_Rab11a质粒载体构建并转染293T细胞的可行性.方法:构建PLC5+mmu_circ_Rab11a过表达质粒载体,采用PCR、基因测序等方法对重组质粒进行验证鉴定.利用脂质体Lipofectamine 3000转染试剂将mmu_circ_Rab11a过表达载体瞬时转染至293T细胞中.利用 RT-PCR检测对照组、空载组(pLC5-ciR)及mmu_circ_Rab11a过表达组中 mmu_circ_Rab11a的基因表达情况并对PCR产物进行Sanger测序验证.mmu_circ_Rab11a过表达质粒载体转染MC3T3,CCK8检测细胞增殖能力.结果与结论:实验成功构建了 mmu_Circ_Rab11a 过表达载体,可促使 293T 细胞高效转染mmu_circ_Rab11a.过表达mmu_circ_Rab11a可提高MC3T3细胞的增殖能力.提示可利用基因工程技术构建mmu_circ_Rab11a过表达载体,通过脂质体法转染法转染293T细胞,使其高效转录mmu_circ_Rab11a,为进一步研究 mmu_circ_Rab11a 的生物功能奠定实验基础.可通过调控 mmu_circ_Rab11a 的表达影响MC3T3细胞的增殖能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐平平		14	24	3.0	4.0
2	徐帅妹		9	19	2.0	4.0
3	童方丽		6	12	3.0	3.0
4	陈蕾		14	14	3.0	3.0
5	元佩燕		4	0	0.0	0.0