电针调控miRNA206/HDAC4轴促进损伤多裂肌修复过程中成肌细胞分化的机制

• 作者: 于佳妮 刘悦 刘通 文希 曾遥 江烨 王小寅 邝伟川 邱晓佳 邹德辉
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 电针 多裂肌 修复 形态学 成肌分化 miRNA206 组蛋白去乙酰化酶4 成肌分化抗原 Myogenin
• 年，卷（期）: 2019,（33）
• 所属期刊栏目: 细胞相关基础实验
• 页码范围: 5341-5346
• 页数: 6页
• 分类号: R496|R454|R318
• 字数: 7541字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.1816

摘要

背景:作者前期的动物及细胞实验研究已证明电针可提高损伤腰多裂肌中Pax7和成肌分化抗原的表达,促进多裂肌的损伤修复.亦有研究证明miRNA206促进成肌分化主要是通过抑制组蛋白去乙酰化酶4实现的.目的:观察电针对布比卡因致大鼠腰多裂肌损伤修复过程中miRNA206/组蛋白去乙酰化酶4表达的影响.方法:实验方案经广东省第二中医院动物实验伦理委员会批准(批准号为048604).将30只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、电针组,每组10只.模型组、电针组采用0.5%布比卡因肌内注射复制大鼠多裂肌损伤模型;对照组予注射等量生理盐水.对照组与模型组不进行针刺干预,电针组予针刺双侧委中穴、肾俞穴,针刺后连接电针,波形选用疏密波,电针频率采用2 Hz/10 Hz,电流强度选择1 mA,持续治疗20 min,每天治疗1次,共治疗7 d.干预7 d后,通过苏木精-伊红染色观察损伤部位多裂肌形态学变化,采用qRT-PCR检测多裂肌中 miRNA206 的表达量,Western-blot 检测多裂肌中成肌分化抗原、Myogenin 及组蛋白去乙酰化酶4蛋白的表达.结果与结论:①苏木精-伊红染色显示,7 d后,对照组可见视野中骨骼肌纤维大部分排列整齐,无明显破坏及巨噬细胞浸润;模型组视野内可见大量肌纤维被破坏,但出现部分肌纤维修复,巨噬细胞数量仍较多;电针组新生肌纤维较多,巨噬细胞较模型组减少;②Western-blot 结果显示,7 d 后,模型组成肌分化抗原、Myogenin、组蛋白去乙酰化酶4蛋白表达均较对照组升高(P < 0.05或P < 0.01);电针组成肌分化抗原、Myogenin蛋白表达较模型组升高(P < 0.01),组蛋白去乙酰化酶4蛋白较模型组降低(P < 0.01);③qRT-PCR结果显示,7 d后,模型组miRNA206表达高于对照组(P < 0.01),电针组miRNA206表达高于模型组(P <0.05);④结果说明,电针可促进多裂肌损伤后成肌分化,其作用可能是通过提高miRNA206表达抑制组蛋白去乙酰化酶4活性实现的.