融合型原肌球蛋白MBP-CTB-TM构建及其口服致敏性评价

• 作者: 傅玲琳 王彦波 王翀 谢梦华 黄健健
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 霍乱毒素B亚基 原肌球蛋白 融合蛋白 食物过敏 小鼠模型
• 年，卷（期）: 2019,（20）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 114-121
• 页数: 8页
• 分类号: TS254.1
• 字数: 6800字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-20190308-104

摘要

将麦芽糖结合蛋白(maltose-binding protein,MBP)、霍乱毒素B亚基(cholera toxin B subunit,CTB)以及增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因重组构建MBP-CTB-EGFP并原核表达纯化,利用HEK293T细胞模型探究MBP-CTB-EGFP穿透细胞膜的能力,从而开发新型黏膜佐剂.进一步地,利用原肌球蛋白(tropomyosin,TM)重组融合蛋白MBP-CTB-TM,将其应用于Balb/c小鼠致敏实验,探究融合蛋白的致敏性及其对小鼠食物过敏相关免疫反应的影响,以达到降低过敏原剂量提高建模效率的效果.结果表明:MBP-CTB-EGFP具有作为黏膜佐剂的能力,从而促进外源蛋白进入HEK293T细胞内,且与转染方式相比,携带外源蛋白进入细胞的效率更高.另一方面,利用融合蛋白MBP-CTB-TM免疫小鼠,TM特异性IgE的OD450 nm达到0.4,而天然TM致敏组仅为0.05,此外融合蛋白致敏还导致高水平的TM特异性IgG1、IgG2a产生.本研究表明,融合蛋白MBP-CTB-TM致敏效果更好,有可能达到降低过敏原用量的效果,为后续食物过敏研究提供了有力工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王彦波	浙江工商大学食品与生物工程学院浙江食品质量安全工程研究院	61	314	10.0	14.0
2	傅玲琳	浙江工商大学食品与生物工程学院浙江食品质量安全工程研究院	48	219	9.0	11.0
3	王翀	浙江工商大学食品与生物工程学院浙江食品质量安全工程研究院	13	42	4.0	5.0
4	黄健健	浙江工商大学食品与生物工程学院浙江食品质量安全工程研究院	3	4	1.0	2.0
5	谢梦华	浙江工商大学食品与生物工程学院浙江食品质量安全工程研究院	3	8	2.0	2.0