植物乳杆菌P-8羟基脂肪酸脱氢酶的克隆表达及活性鉴定

• 作者: 刘扬 包秋华 张和平 王丹 赵国芬 赵彤彤 赵微
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 植物乳杆菌P-8 羟基脂肪酸脱氢酶 生物信息学 共轭亚油酸 重组表达
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 36-40
• 页数: 5页
• 字数: 4399字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.018180

摘要

以植物乳杆菌P-8的基因组DNA为模板扩增出其羟基脂肪酸脱氢酶基因,对其进行生物信息学分析,结果表明该基因共编码286个氨基酸,蛋白质理论分子质量约为32 kDa,理论等电点为5.15,不含跨膜区,是1个亲水性的细胞质蛋白.Ser、Thr、Tyr磷酸化位点个数分别为3、3、7.蛋白质的二级结构主要构成方式为α螺旋、无规则卷曲和β折叠.将此基因连接到pET-28a(+)质粒载体中构建重组质粒pET28a-DH,并转化入大肠杆菌E.coli Transetta(DE3)中获得重组大肠杆菌.重组菌在16℃条件下,经0.1 mmol/L IPTG诱导16h有可溶性表达,经Western Blot验证确定为重组羟基脂肪酸脱氢酶.通过镍柱亲和层析,得到纯化的重组酶.重组酶经初步活性检测,结果显示重组酶可以转化10-羟基-顺-12-十八碳烯酸为10-氧代-顺-12-十八碳烯酸,本研究为进一步探明植物乳杆菌P-8转化共轭亚油酸的机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张和平	内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室	234	2734	26.0	39.0
2	赵国芬	内蒙古农业大学生命科学学院	37	154	7.0	10.0
3	刘扬	内蒙古农业大学生命科学学院	9	61	4.0	7.0
4	王丹	内蒙古农业大学生命科学学院	24	124	7.0	10.0
5	赵微	内蒙古农业大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
6	赵彤彤	内蒙古农业大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0