摘要:
目的 观察五味子甲素对人胰腺癌细胞株AsPc-1增殖、凋亡的影响,并探讨其机制.方法 将AsPc-1细胞分为5组,分别加入12.5、25、50、100 μmol/L的五味子甲素药液和等量培养基,记为12.5 μmol/L组、25μmol/L组、50 μmol/L组、100 μmol/L组和对照组,各组培养48 h后采用CCK-8法检测细胞增殖率.将AsPc-1细胞分为2组,分别加入100 μmol/L五味子甲素药液和等体积PBS,记为五味子甲素组和对照组,各组培养9d后采用细胞平板克隆实验检测细胞克隆数.将AsPc-1细胞分为2组,分别加入100 μmol/L五味子甲素药液和等体积PBS,记为五味子甲素组和对照组,各组培养24h后采用流式细胞术检测细胞凋亡率.将AsPc-1细胞分为4组,分别加入25、50、100 μmol/L的五味子甲素药液和等量培养基,记为25 μmol/L组、50 μmol/L组、100 μmol/L组和对照组,采用Western blotting法检测各组细胞β-catenin蛋白和凋亡相关蛋白Bcl2、Bax.将AsPc-1细胞分为2组,分别加入100 μmol/L五味子甲素药液和等体积PBS,记为五味子甲素组和对照组,采用免疫荧光法观察各组细胞3-catenin蛋白核定位.结果 12.5μmol/L组、25 μmol/L组、50 μmol/L组、100 μmol/L组、对照组细胞增殖率分别为95.3%±3.5%、73.2%±1.8%、56.6%±3.3%、41.4%±2.9%、100.0%,其中12.5 μmol/L组与对照组相比,P>0.05;其余各组间相比,P均<0.05.五味子甲素组、对照组的细胞克隆数分别为(410±30)、(180±20)个,细胞凋亡率分别为16.36%±1.54%、4.58%±0.83%,各指标组间相比,P均<0.05.随着五味子甲素浓度增加,AsPc-1细胞Bcl2蛋白的相对表达量逐渐下调,而Bax蛋白的相对表达量逐渐增加,全长度β-catenin蛋白和78 kD的β-catenin蛋白的相对表达量也逐渐下调.五味子甲素组β-catenin蛋白在细胞核的聚集明显减少.结论 五味子甲素可以抑制人胰腺癌细胞AsPc-1的增殖(呈浓度依赖性)、克隆形成能力,促进细胞凋亡;五味子甲素可能是通过降低β-catenin蛋白的表达和水解、减少其在细胞核内的定位发挥调控作用.