黑曲霉酸性蛋白酶EXPA的克隆表达与酶学性质解析

• 作者: 刘晓光 宋鹏 王正祥 王鑫 董自星 金鹏
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 酸性蛋白酶 黑曲霉 分子克隆 酶学特征
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 40-46
• 页数: 7页
• 字数: 5030字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.018387

摘要

酸性蛋白酶在食品、酿造、饲料和皮革等行业具有重要的应用价值.然而,现有的酸性蛋白酶在50℃以上或pH ＞3.0时不稳定,限制了其应用范围.该研究通过分子克隆技术将黑曲霉CICIM F0510的酸性蛋白酶基因expA在毕赤酵母中进行了克隆表达,构建获得了重组菌GS115 (pPIC-expA).摇瓶发酵条件下,重组酶EX-PA的酶活为257 380 RFU/h.生物信息学分析的结果显示,该酶属于天冬氨酸蛋白酶A1A家族.酶学性质的研究表明,该重组酶的最适反应温度和pH分别为50℃和3.0;分别在40 ～50℃或pH 2.5～3.5孵育1h后,仍能保留80％左右的活力.Zn2+、Ca2+、Fe2+和M n2对其活性有一定的促进作用;而Cu2+、Co2+、Fe3+、EDTA和SDS则对其活性有显著的抑制作用.此外,重组酶EXPA对大豆分离蛋白、水溶性玉米蛋白和小麦水解蛋白均具有较好的水解作用.较好的耐热性和pH稳定性为EXPA在食品、饲料等领域的应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董自星	天津科技大学化工与材料学院	14	15	3.0	3.0
2	刘晓光	天津科技大学化工与材料学院	15	16	3.0	3.0
3	金鹏	天津科技大学化工与材料学院	16	9	2.0	2.0