H5、H7、H9亚型禽流感病毒三重RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 刘宇卓 刘青涛 吴青 李银 杨婧 毕可然 赵冬敏 赵翰飞 韩凯凯 黄欣梅
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 H5亚型 H7亚型 H9亚型 三重RT-PCR
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医与水产蚕桑
• 页码范围: 204-207
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65+7
• 字数: 3955字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2019.09.047

摘要

根据GenBank中H5、H7、H9亚型禽流感病毒血凝素蛋白(HA)编码基因,使用DNAStar软件比较分析筛选出特异的保守片段,设计3对引物H5-P1/H5-P2、H7-P3/P4和H9-P5/P6.在此基础上,建立了H5、H7、H9亚型禽流感的三重RT-PCR检测方法,本方法可同时检测出样品中的H5、H7、H9亚型禽流感病毒.敏感性试验结果表明,该方法检测H5、H7、H9亚型禽流感RNA的敏感性分别达2.80、10.50、5.73 pg/μL,该方法检测其他相关病毒时均为阴性,具有很高的特异性,此外,该方法具有良好的重复性.利用所建立方法对240份禽流感临床样品进行检测,结果与血凝试验和血凝抑制试验结果的符合率为100％.此诊断方法检出时间早,且特异、敏感、经济、快速,可普遍推广,在禽流感诊断和防制中具有重要意义和应用价值.