OsRhoGDI2过表达转基因水稻的筛选鉴定及外源基因拷贝数的初步分析

• 作者: 尚飞 杜京尧 梁卫红 王高华
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: OsRhoGDI2 转基因水稻 表达分析 拷贝数 外源基因
• 年，卷（期）: 2019,（14）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 50-54
• 页数: 5页
• 分类号: S511.03
• 字数: 4085字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2019.14.011

摘要

水稻Rho GDP解离抑制基因OsRhoGDI2是从幼穗中分离出的功能未知基因.为鉴定该基因的功能,笔者所在实验室前期构建了植物过表达载体pCAMBIA1302-OsRhoGDI2-GFP,并对水稻进行了遗传转化.对OsRhoGDI2过表达转基因水稻T2代进行筛选和鉴定,采用PCR技术鉴定转基因植株,采用半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR检测OsRhoGDI2在转基因水稻中的表达水平,结果显示,其中6个株系为过表达转基因植株,OsRhoGDI2表达水平上调1.69～13.35倍.为检测外源基因在转基因水稻中的拷贝数,分别以蔗糖磷酸合成酶基因SPS和潮霉素抗性基因HYG为内参基因和标记基因,采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术结合内参基因和标记基因的标准曲线进行分析,结果显示在所检测的6个转基因株系中,外源基因的拷贝数均为1,提示已经获得稳定遗传的OsRhoGDI2过表达转基因水稻,为后续OsRhoGDI2基因的功能研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁卫红	河南师范大学生命科学学院	52	262	8.0	14.0
2	尚飞	河南师范大学生命科学学院	3	1	1.0	1.0
3	杜京尧	河南师范大学生命科学学院	3	3	1.0	1.0
4	王高华	河南师范大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0