摘要:
目的 研究肉苁蓉提取物松果菊苷(Echinacoside,ECH)对糖尿病心肌病db/db小鼠模型心肌细胞是否具有保护作用及可能的作用机制.方法 将29只SPF级6周龄雄性dNdb小鼠和db/m小鼠适应性饲养1周后,按照随机数字表法取9只db/m小鼠作为正常对照组(db/m组,n=9),将db/db小鼠分为糖尿病心肌病组(db/db组,n=10)与松果菊苷干预组(db/db+ECH组,n=10).其中db/db组和db/m组每日按照0.05 ml/10 g标准进行生理盐水灌胃2周.db/db+ECH组小鼠按松果菊苷300 mg/(kg·d)灌胃2周.每周监测三组的小鼠体重,观察小鼠摄食、饮水及活动情况.于第10周用2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠并处死,取尾静脉血测定空腹血糖(FBG).采用HE染色观察心肌组织病理改变,采用Tunel染色法测定心肌细胞凋亡率,采用免疫印迹(Western blot)法检测凋亡相关蛋白p53、p38MAPK、caspase-3和caspase-8的表达水平,采用real-time PCR测定心肌细胞p53、p38MAPKmRNA和caspase mRNA、Bcl-2、Bax mRNA的表达水平.结果 与db/m组相比,db/db组小鼠的体重、血糖和血脂水平显著升高(P<0.05或P<0.01).HE染色切片显示,与db/m组比较,db/db组小鼠的心肌细胞可见明显肥大、坏死,心肌细胞排列结构紊乱;而db/db+ECH组小鼠的心肌细胞形态有所缓解,细胞间隙减少,排列较规则.Tunel染色观察心肌细胞凋亡指数显示,相较于db/m组,db/db组小鼠的心肌细胞凋亡程度显著增高(P<0.01),同时伴有p53蛋白、p38MAPK蛋白、caspase-3和caspase-8蛋白表达量显著升高(P<0.01),且p53、p38MAPK mRNA和caspase mRNA、Bax mRNA表达量明显上升,Bcl-2 mRNA水平下调即Bcl-2/Bax水平降低(P<0.01).与db/db组比较,db/db+ECH组上述指标均有明显降低,且Tunel染色观察小鼠心肌细胞凋亡指数显著下降(P<0.01).结论 松果菊苷能够明显改善db/db小鼠心肌细胞凋亡,其机制可能与通过p53/p38MAPK/caspase信号转导途径有关.