小鼠原代肝细胞中PTEN基因沉默所需siRNA的筛选

• 作者: 周龙 王立林 胡序怀
• 来源期刊: 中国当代医药
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠原代肝细胞 PTEN磷酸水解酶 小干扰RNA 胰岛素抵抗
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 22-24,28
• 页数: 4页
• 分类号: R332
• 字数: 2794字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-4721.2019.08.008

摘要

目的 筛选出小鼠原代肝细胞中PTEN基因沉默所需的高效siRNA.方法 采用两步胶原酶灌注法分离小鼠原代肝细胞,放入25 cm2胶原包被瓶中(1×106个/瓶),均分为5组:对照组(C组)、阴性对照组(NC组)、siR-996组、siR-1381组、siR-1519组.采用HiPerFect转染试剂将各组对应的siRNA序列转入小鼠原代肝细胞,24 h后提取RNA和蛋白,通过Real-time PCR检测各组PTEN mRNA表达,通过Western blot检测各组PTEN蛋白含量.结果 siR-996组、siR-1381组和siR-1519组的PTEN蛋白含量低于NC组,差异有统计学意义(P＜0.01),siR-996组、siR-1381组和siR-1519组的PTEN mRNA水平低于NC组,差异有统计学意义(P＜0.01).siR-996组的PTEN蛋白含量及PTEN mRNA水平最低,其PTEN蛋白含量及PTEN mRNA水平的沉默效率高于siR-1381组和siR-1519组.结论 siR-996是小鼠原代肝细胞中PTEN基因沉默所需的高效siRNA.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周龙		5	6	1.0	2.0
3	胡序怀		4	2	1.0	1.0
4	王立林		14	67	5.0	8.0