肿瘤靶向递呈外源蛋白减毒沙门菌的构建与鉴定

• 作者: 万丹 孔桂美 孙国壮 王继军 陶文华 黄小丽
• 来源期刊: 扬州大学学报（农业与生命科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 减毒沙门菌 单链抗体 血管内皮生长因子受体 肿瘤靶向递呈
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 页码范围: 16-20,26
• 页数: 6页
• 分类号: R735.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.16872/j.cnki.1671-4652.2020.01.003

摘要

利用沙门菌膜插入和分泌蛋白(MisL)能展示外源蛋白于细菌表面的能力,构建血管内皮生长因子受体单链抗体(scFv-KDR)的原核表达载体(pYA3332-misL-scFv-KDR),将scFv-KDR展示于减毒沙门菌表面,获得的KDR沙门菌(KDR-X4450)有助于沙门菌靶向肿瘤和肿瘤血管细胞;利用环氧合酶(COX-2)具有高度的肿瘤组织特异性,构建COX-2启动子介导的GFP真核表达载体(pGL3-basic-hCOX2-GFP).将真核载体转化展示有scFv KDR的KDR-X4550得到KDR-GFP沙门菌(KDR-GFP-X4550),KDR-GFP-X4550感染肿瘤细胞,COx-2启动子启动外源基因GFP的表达;SDS-PAGE检测scFv-KDR在沙门菌的表达,细菌计数KDR-X4550进入肿瘤细胞的数量;荧光显微镜观察COX-2启动子启动外源基因表达及KDR-GFP-X4550靶向递呈外源蛋白的能力.结果 表明:scFv-KDR能展示在沙门菌表面,展示有KDR单链抗体的沙门菌比野生菌更容易进入肿瘤细胞;与正常细胞相比,COX-2启动子能在肿瘤细胞内启动GFP表达,KDR-GFP-X4550具有靶向递呈GFP的能力.这一研究为重组沙门菌进一步应用研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孔桂美		52	330	10.0	16.0
2	孙国壮		6	7	2.0	2.0
3	陶文华		8	102	4.0	8.0
4	王继军		6	15	2.0	3.0
5	黄小丽		7	32	3.0	5.0
6	万丹		4	4	1.0	2.0