ADV VP2主要抗原表位基因核酸疫苗与IL-12、IFN-γ细胞因子佐剂质粒的构建及鉴定

• 作者: 廉士珍 张海玲 张蕾 朱翔宇 朱言柱 柏玲 胡博
• 来源期刊: 特产研究
• 学科: 农学
• 关键词: 水貂阿留申病毒 VP2 抗原抗体复合物 IL-12 IFN-γ 核酸疫苗
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-8,14
• 页数: 9页
• 分类号: S852.65|Q786
• 字数: 6923字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16720/j.cnki.tcyj.2020.02.001

摘要

为研制安全有效的水貂阿留申病毒(ADV) VP2核酸疫苗,本研究构建了不含有形成抗原抗体复合物表位的VP2核酸疫苗以及IL-12、IFN-γ细胞因子真核表达质粒,在体外细胞水平鉴定上述目的基因的表达情况.首先,以各克隆质粒为模板,PCR扩增获得ADV的VP2主要抗原表位M、鼠IL-12和IFN-γ的基因片段,连接至pVAX1载体,经酶切及测序鉴定后,确定构建正确;其次,将真核表达质粒转染入293T细胞,通过间接免疫荧光及Western Blot分析表达情况.结果 显示:pVAX 1-M可正常表达,并且目的蛋白可与ADV阳性血清结合,具有良好的反应原性.含细胞因子的真核表达质粒pVAX 1-IL及pVAX1-IF转染293T细胞后,通过间接免疫荧光、Western Blot及ELISA分析证明,目的蛋白可在体外正常表达,且具有生物学活性.本研究可为水貂阿留申病核酸疫苗深入研究奠定基础.