大豆二酰甘油酰基转移酶基因GmDGAT1A启动子的克隆与功能分析

• 作者: 孙新凯 张晋玉 晁毛妮 温青玉 王润豪 胡喜贵 黄中文
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆 二酰甘油酰基转移酶(DGAT) 启动子 油脂 GUS
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·生物技术
• 页码范围: 27-34
• 页数: 8页
• 分类号: S565.03|Q78
• 字数: 5090字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.20190821

摘要

二酰甘油酰基转移酶(DGAT)是催化三酰甘油生物合成的关键酶,在三酰甘油的合成和积累过程中具有重要调控作用.为了研究大豆DGAT基因表达调控的分子机制,以大豆品种科丰1号为材料,通过PCR方法对Gm-DGAT1A的启动子(promoter-GmDGAT1A,pGmDGATIA)进行克隆,并通过转化拟南芥和GUS组织定位研究其功能.结果表明:以大豆叶片DNA为模板,成功克隆到GmDGAT1A基因ATG上游2192 bp启动子序列.序列分析表明,pGm-DGAT1A除具有启动子所必需的TATA-box和CAAT-box等基本顺式作用元件外,还含有多个响应于光、赤霉素和脱落酸等顺式作用元件.以GUS为报告基因,成功构建了植物表达载体pCAMBIA1381Z-pGmDGAT1A,并转化野生型拟南芥获得转基因植株.对转基因拟南芥植株进行PCR检测,能扩增到2192 bp目标条带,表明已获得含有pGmDGAT1A的转基因拟南芥阳性植株.GUS组织化学染色结果显示,转基因拟南芥幼苗的叶脉和根染色较深,但是主根和侧根的根尖部分未染色;成熟期转基因拟南芥植株的根、叶脉以及角果内的隔膜和珠柄染色较深,茎和发育的种子未染色,表明pGmDGAT1A驱动的GUS主要在转基因拟南芥的根、叶脉以及角果内的隔膜和珠柄中表达.综上,克隆的大豆GmDGAT1A启动子具有活性,能够驱动下游目标基因的表达,有望应用于转基因育种.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡喜贵	河南科技学院现代生物育种河南省协同创新中心	12	23	3.0	4.0
2	温青玉		18	40	4.0	5.0
3	张晋玉	河南科技学院现代生物育种河南省协同创新中心	4	15	2.0	3.0
4	晁毛妮	河南科技学院现代生物育种河南省协同创新中心	7	22	3.0	4.0
5	王润豪	河南科技学院现代生物育种河南省协同创新中心	4	5	2.0	2.0
6	孙新凯	河南科技学院现代生物育种河南省协同创新中心	1	0	0.0	0.0