毛细管电泳法测定天麻素对乙酰胆碱酯酶活性的抑制

• 作者: 刘春叶 张剑 张博 贺茂芳 韩禄 高东羽
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: 毛细管电泳 乙酰胆碱酯酶 乙酰胆碱酯酶抑制剂 天麻素
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1102-1106
• 页数: 5页
• 分类号: O658
• 字数: 3828字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1123.2020.02015

摘要

阿尔茨海默症(AD)是引起中老年人痴呆最常见的疾病.目前治疗AD的药物主要为乙酰胆碱酯酶抑制剂(AChEI).建立快速地从天然产物中筛选AChEI的方法,将对临床治疗AD产生积极的作用.该研究建立了一种简单可靠的AChEI筛选新方法.通过海美溴铵在毛细管内壁形成一段正电荷涂层,再经过离子吸附作用制备1.5 cm长的乙酰胆碱酯酶(AChE)反应器.底物碘化乙酰硫代胆碱在0.015 MPa压力下进样10 s,在微酶反应器中停留1 min后采用毛细管电泳(CE)法对底物和酶解产物进行分离.天麻素是天麻的重要药效成分之一,对AChE具有抑制作用.该研究以天麻素为例,根据加入药物前后酶解产物峰面积的差异,完成天麻素对AChE活性的抑制能力的测定.结果表明,随着天麻素浓度的增加,产物峰面积逐渐减小,对AChE的活性抑制变大.该方法所建微酶反应器产物峰面积的RSD值小于5.3％,可连续使用300次.当天麻素浓度为5.24μmol/L时,对AChE活性抑制率达到64.8％.根据加入不同浓度天麻素时的抑制率,测定出天麻素的IC50值为(2.26±0.14)μmol/L(R2=0.9983).与传统紫外分光光度法所得结果(2.09±0.18)μmol/L吻合较好.固定化酶微反应器的活性变差时,可以洗脱掉固定在柱上的AChE,重复酶的固定化步骤即可完成再生.该方法简单、高效,运行成本低,柱上固定的AChE酶反应器稳定性较好,可重复使用,极大地提高了工作效率,未来有望应用于各类AChEI的高通量筛选,对AD药物的研发具有积极作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘春叶	西安医学院药学院	63	163	7.0	9.0
2	张博	西安医学院药学院	38	200	7.0	13.0
3	韩禄	西安医学院药学院	14	9	1.0	2.0
4	贺茂芳	西安医学院药学院	13	8	1.0	2.0
5	张剑	西安医学院药学院	8	10	2.0	3.0
6	高东羽	西安医学院药学院	1	0	0.0	0.0