摘要:
目的 探讨复方柴金解郁片(CJJYT)对抑郁症认知障碍的改善作用及其潜在机制.方法 体外实验中,从胎鼠全脑中分离海马,进一步培养海马神经元细胞;实验前18 h,除对照组外,每组均加50μM CORT构建抑郁环境;建立模型后,空白血清组加10%空白血清,CJJYT组、文拉法辛组分别加入对应10%含药血清,空白组和模型组则加入等体积培养液.检测各组海马神经元细胞内Ca2+平均荧光强度;记录mEPSC电流幅度和频率,评估海马神经元的突触功能.此外,通过免疫荧光染色,高内涵分析海马神经元突触可塑性相关蛋白SYN-α、NR2A、NR2B、PSD-95、CaMKⅡ和SynGAP的表达;采用反转录聚合酶链反应检测SYN-α、NR2A、NR2B、PSD-95、CaMKⅡ和SynGAP的mRNA表达.在体内实验中,除对照组外,其他大鼠均孤笼饲养,并采用慢性不可预知性应激刺激复制抑郁模型,并给予相应的药物干预.通过行为学测试评估抑郁大鼠的学习、记忆能力及其他认知能力;采用酶联免疫吸附测定法检测各组大鼠CORT水平;采用Golgi-Cox染色观察海马CA1和DG神经元突触形态的变化.结果 体外实验:CJJYT干预降低了海马神经元细胞内Ca2+平均荧光强度(P<0.05),并降低mEPSC的频率和电流幅度(P<0.05),从而抑制了突触后受体的过度活动.CJJYT干预降低了海马神经元SYN-α,NR2A,NR2B和PSD-95的蛋白表达和mRNA表达(P<0.05);增加CaMKⅡ和SynGAP蛋白表达和mRNA的表达(P<0.05),从而改善海马神经元的突触可塑性.在体内,CJJYT干预可改善蔗糖偏爱,自主活动,Morris水迷宫测试的学习和记忆能力(P<0.05),抑制食欲和增加强迫游泳测试绝望感(P<0.05);CJJYT干预可降低CORT水平(P<0.05),促进海马神经元突触损伤的修复.结论 CJJYT可以改善大鼠海马的突触功能,对海马神经元有显著的保护作用,可修复海马神经元的结构损伤,提高抑郁模型大鼠的认知能力,其改善认知的机制可能与SYN-α/NR及其下游神经递质的传递和功能有关.