miR-33a靶向Lipin1和IRS2调节绵羊前体脂肪细胞分化的研究

• 作者: 乔利英 刘建华 刘文忠 刘旭莹 梁煜 潘洋洋 王凤 王强 赵弼时
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: miR-33a Lipin1 IRS2 绵羊 脂肪细胞分化
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 遗传育种
• 页码范围: 701-712
• 页数: 12页
• 分类号: S826.2
• 字数: 7282字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2020.04.006

摘要

旨在揭示miR-33a在绵羊前体脂肪细胞分化中的生物学功能.本研究以15日龄雄性绵羊背部皮下前体脂肪细胞为试验材料,所有的试验均设立3个重复;利用生物信息学软件预测miR 33a的靶基因,并通过双荧光素酶报告试验对预测的潜在靶基因进行验证;用qPCR和Western blotting分别检测miR-33a、Lipin1和IRS2及其编码蛋白的表达,以揭示miR-33a与其靶基因在绵羊前体脂肪细胞分化中的表达规律;慢病毒介导实现miR-33a的过表达和干扰后,检测Lipin1、IRS2和成脂标志基因的表达,并用油红O染色检测脂滴沉积能力,以解析miR-33a对其靶基因的调节机制.生物信息学分析发现,miR-33a与Lipin1和IRS2 3'-UTR都存在结合位点,miR-33a显著下调Lipin1和IRS2野生型双荧光质粒的相对荧光活性(P＜0.05);在绵羊前体脂肪细胞分化中,miR-33a与Lipin1和IRS2的表达趋势相反;过表达miR-33a后,显著下调了Lipin1 (P＜0.01)和IRS2(P＜0.05)及其编码蛋白以及成脂标志基因的表达;干扰miR-33a后,这些基因和蛋白的表达则显著上调;过表达miR-33a减少了脂滴沉积,干扰miR-33a促进了脂滴沉积.在绵羊前体脂肪细胞分化中,miR-33a与Lipin1和IRS2的表达呈负相关.miR-33a靶向Lipin1和IRS2的3'UTR抑制绵羊前体脂肪细胞分化和脂滴沉积.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘建华	山西农业大学动物科技学院	32	193	8.0	12.0
2	乔利英	山西农业大学动物科技学院	45	148	6.0	10.0
3	潘洋洋	山西农业大学动物科技学院	12	30	3.0	4.0
4	王强	山西农业大学动物科技学院	8	15	3.0	3.0
5	赵弼时	山西农业大学动物科技学院	1	0	0.0	0.0
6	刘旭莹	山西农业大学动物科技学院	1	0	0.0	0.0
7	王凤	山西农业大学动物科技学院	1	0	0.0	0.0
8	梁煜	山西农业大学动物科技学院	2	0	0.0	0.0