小鼠B细胞亚群及其组织分布的流式细胞检测方法的优化

• 作者: 屠鹏飞 朱枝祥 李芸芊 郭冉
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: B细胞亚群 标志物 组织分布 流式细胞术
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 实验方法
• 页码范围: 302-310
• 页数: 9页
• 分类号: R965.2
• 字数: 6037字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2020.04.007

摘要

目的 优化B细胞亚群及其组织分布的流式细胞分析的荧光染色方案,以用于免疫调控药物的活性评价.方法 取小鼠外周血、腹膜腔细胞、脾细胞、淋巴结细胞和骨髓细胞,分别通过3种荧光抗体染色方案对各种细胞进行染色:①抗B220,CD5和CD11b的荧光抗体及7-氨基放线菌素D(7-AAD)染色;②抗B220,CD43,CD93,CD23和IgM的荧光抗体及7-AAD染色;③抗B220,CD27和CD138的荧光抗体及7-AAD染色.然后利用流式细胞术分析B细胞亚群,通过优化的表面标志物组合确定各种B细胞亚群,再统计各种B细胞亚群在多种组织中的分布.结果 第①种染色方案可区分B1a,B1b和B2细胞;第②种染色方案可区分原始B细胞、不成熟和成熟B细胞;第③种染色方案可区分记忆性B细胞和浆细胞.外周血中主要包含成熟B细胞和一种特殊的不成熟B细胞;腹膜腔中主要包含B1a细胞和成熟B细胞;脾中主要包含成熟B细胞、边缘区B细胞及T1和T2期不成熟B细胞;淋巴结中主要包含成熟B细胞;骨髓中包含各种发育阶段B细胞,主要包含前B细胞(pre-B细胞)和T1期不成熟B细胞.记忆性B细胞和浆细胞在各种组织中都只占B细胞的较小比例.结论 本研究采用的荧光染色方案可特异准确地分析B细胞亚群及其组织分布,可用于免疫调控药物的活性评价.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	屠鹏飞	北京中医药大学中药学院	33	238	7.0	14.0
2	郭冉	北京中医药大学中药学院	2	0	0.0	0.0
3	李芸芊	北京中医药大学中药学院	2	0	0.0	0.0
4	朱枝祥	北京中医药大学中药学院	3	0	0.0	0.0