锦鲤墨蝶呤还原酶基因的克隆、表达和定位分析

• 作者: 冯彩 刘慧芬 吴利敏 宋红梅 李学军 田雪 胡菊 胡隐昌 马晓
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 锦鲤 spr 基因克隆 蝶啶代谢 体色
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 页码范围: 551-561
• 页数: 11页
• 分类号: Q785|S917.4
• 字数: 7359字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20190711869

摘要

为探究SPR在锦鲤体色形成中的作用,实验利用RACE技术获得spr cDNA全长序列,并分析其时空表达模式,同时利用Western blot和免疫组织化学方法检测SPR蛋白在皮肤、鳍条和鳞片中的分布和表达情况.结果显示,spr cDNA全长879 bp,包含132 bp和134 bp的5′和3′非编码区,开放阅读框510 bp,编码170个氨基酸残基.氨基酸序列比对和系统进化树分析显示,锦鲤SPR具有保守的adh_short_C2结构域,与金鱼相似性高达97.7％.spr在各组织中均有表达,其中皮肤的表达量最高.spr在锦鲤个体发育的4个阶段表现为先降后升.纯红、纯白及红白3种体色锦鲤皮肤、鳞片和鳍条中spr mRNA和蛋白表达水平基本一致,在纯红锦鲤皮肤中表达量最高,红白锦鲤白色皮肤、鳞片和鳍条的表达量最低.SPR组织定位分析显示,红色锦鲤和白色锦鲤皮肤中均检测到阳性信号,其中红色皮肤阳性信号强度高于白色皮肤.研究表明,spr可能与锦鲤红/黄色素细胞的分化和形成具有一定相关性,参与了锦鲤体色的形成.