利用条件性重编程细胞技术构建前列腺癌原代细胞库

• 作者: 庞俊 张俊夫 李永红 杨伟娇 段剑礼 王自峰 雷汉祺
• 来源期刊: 中华泌尿外科杂志
• 关键词: 肿瘤细胞,培养的 前列腺癌 条件性重编程技术 原代细胞培养 精准医学
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 374-381
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn112330-20200309-00173

摘要

目的 利用条件性重编程细胞(CRC)技术培养人源性前列腺癌细胞,为前列腺癌体外实验研究建立个体化原代细胞库.方法 2019年1-4月共获取3例新鲜的前列腺癌病理组织标本,将标本分为2份,一份经术中快速冰冻病理检查确定为癌组织;另一份用0.25％ EDTA酶消化为分散的悬浮单个的癌细胞,利用CRC技术对癌细胞进行培养.培养方法:将原代细胞与经30 Gy照射的3T3-J2小鼠成纤维细胞共培养于条件性培养基中,观察癌细胞克隆团生长情况.使用差异性消化对原代细胞进行传代:先用0.25％ EDTA胰酶消化1 min去除饲养层细胞,PBS清洗后再用0.25％EDTA胰酶消化原代细胞.待癌细胞稳定后,通过免疫荧光、免疫组化染色、免疫印迹和荧光原位杂交技术等实验,验证所培养的癌细胞性质.结果 体外利用CRC技术建立3例前列腺癌原代细胞株,细胞培养约15 d建系成功,并可持续稳定传代.细胞鉴定结果显示,所培养的细胞均表达AR、CK5、CK18和P504s,同时也弱表达PSA.荧光原位杂交技术显示细胞出现≥1.6％的TMPRSS2/ERG基因融合,这些现象符合前列腺癌的细胞特征.结论 利用CRC技术能稳定地体外持续培养前列腺癌原代细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	庞俊	中山大学附属第七医院泌尿外科	37	247	10.0	14.0
2	杨伟娇	中山大学附属第三医院泌尿外科	4	12	1.0	3.0
3	段剑礼	中山大学附属第三医院泌尿外科	2	0	0.0	0.0
4	王自峰	中山大学附属肿瘤防治中心实验研究部	1	0	0.0	0.0
5	雷汉祺	中山大学附属孙逸仙纪念医院泌尿外科	1	0	0.0	0.0
6	张俊夫	中山大学附属第七医院泌尿外科	2	0	0.0	0.0
7	李永红	中山大学附属肿瘤防治中心泌尿外科	23	57	5.0	6.0