通过GbF3'H基因单独沉默及其与GbCHI和GbDFR基因共沉默研究其在海岛棉中抗枯萎病功能

• 作者: 曲延英 李玉霞 王慧敏 艾海提·艾合买提 陈全家 陈琴 黄启秀
• 来源期刊: 棉花学报
• 关键词: 海岛棉 GbF3'H 枯萎病抗性 病毒诱导的基因沉默(VIGS) 共沉默 实时荧光定量聚合酶链式反应
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 研究与进展
• 页码范围: 1-10
• 页数: 10页
• 字数: 5974字
• 语种: 中文

摘要

[目的]通过沉默海岛棉GbF3'H基因及共沉默GbF3'H、GbCHI和GbDFR基因,研究其在海岛棉抗枯萎病中的作用.[方法]以海岛棉抗病材料06-146为研究对象,GhCLA1基因为阳性对照,空载体为阴性对照,构建海岛棉TRV2-GbF3'H沉默载体,协同课题组前期构建的TRV2-CHI和TRV2-DFR载体,利用病毒诱导的基因沉默技术(Virus-induced gene silencing,VIGS)分别进行GbF3'H基因单独沉默以及GbF3'H、GbCHI和GbDFR这3种基因共沉默试验.通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative real time-polymerase chain reaction,qRT-PCR)分析各处理样品中基因沉默情况;设置室内接种枯萎病菌试验测定病情指数,分析各沉默材料对枯萎病的抗性差异.[结果]qRT-PCR结果显示,海岛棉GbF3'H基因沉默后其在海岛棉根、茎和叶中的表达量比空载体对照低,GbF3'H、GbCHI和GbDFR这3种基因共沉默后其在海岛棉根、茎和叶中的表达量均比空载体对照低.病情指数调查结果显示,野生型<空载体对照<GbF3'H单基因沉默组<3种基因共沉默组,说明共沉默材料对枯萎病的抗性明显低于单基因沉默材料,单基因沉默材料明显低于空载体对照和野生型.[结论]初步确定GbF3'H基因对提高海岛棉枯萎病抗性有一定作用,且可与GbCHI、GbDFR基因协同作用增强抗病性,这可为海岛棉功能基因组学研究提供参考.