产(R)-1,3-丁二醇的工程菌构建及转化条件研究

• 作者: 宋水山 宋聪 巩建英 张翔 李冉 贾振华
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 羰基还原酶 (R)-1,3-丁二醇 4-羟基-2-丁酮 生物转化
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 116-120,128
• 页数: 6页
• 分类号: Q814
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2020.02.0020

摘要

[目的]利用重组大肠杆菌实现(R)-1,3-丁二醇的生物合成.[方法]从脱硫球菌(Desulfococcus biacutus)中克隆得到羰基还原酶基因DbCR,构建pET28a-DbCR表达载体并在大肠杆菌E.coli BL21中表达,利用气相色谱对反应液进行检测.[结果] DbCR在pH 7.5、35 ℃的最适条件下的酶活力为4.5 U/mL.在50 mL全细胞反应体系中,重组工程菌在pH 7.5、30℃条件下,反应48 h时,对300 mmol/L底物4-羟基-2-丁酮的转化率＞96％,产物(R)-1,3-丁二醇的e.e.值＞99％.[结论]构建得到高效催化合成(R)-1,3-丁二醇的工程菌,工程菌对底物的转化率＞96％,产物纯度＞99％.