二苯乙烯苷抗氧化和抗炎作用的机制研究

• 作者: 于卫华 吴浩芝 徐宇航 朱敬朴 李文丽 海春旭 赵九洲 郑义鹏 陈子卓
• 来源期刊: 癌变·畸变·突变
• 学科: 医学
• 关键词: 二苯乙烯苷 抗氧化 抗炎 核因子E2相关因子2 RAW264.7细胞
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 105-111,117
• 页数: 8页
• 分类号: R114
• 字数: 5942字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-616x.2020.02.005

摘要

目的:以小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞为研究对象,探讨二苯乙烯苷(TSG)介导的抗氧化和抗炎作用及其调控机制.方法:30、60和120 μmol/L的二苯乙烯苷预处理4h,然后以1μg/mL的脂多糖(LPS)刺激小鼠巨噬细胞(RAW264.7)12 h,并设置空白对照组、地塞米松(100 nmol/L)阳性对照和Nrf2抑制剂寒鸦子酸(brusato,50μmol/L)干预组,其中地塞米松和brusatol预处理RAW264.7细胞4h.观察光镜下RAW264.7细胞形态学的改变并统计其被激活比例;ELISA法检测培养液中TNF-α和IL-6的水平;通过DCFH-DA和Mito-SOXTM荧光探针染色,流式细胞仪检测细胞内和线粒体内的ROS水平变化;免疫荧光法检测Nrf2的表达水平变化;Western blot检测核内Nrf2蛋白水平变化;Real-time PCR测定Nrf2下游抗氧化酶HO-1、SOD2、SOD1、CAT和GPX-1表达.结果:与空白对照组细胞相比,LPS处理后RAW264.7细胞活化,胞体增大,形成大量伪足,培养基中TNF-α和IL-6增多.二苯乙烯苷可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞激活,降低培养基中TNF-α和IL-6,且效果优于阳性对照药物地塞米松.同时,二苯乙烯苷可促进Nrf2核转位,并促进下游抗氧化酶HO-1、SOD2和CAT表达,减轻细胞内ROS生成.而brusatol可通过阻断Nrf2活性抑制二苯乙烯苷的抗炎作用.结论:二苯乙烯苷可激活Nrf2及其下游抗氧化酶的表达,具有良好的抗炎和抗氧化作用,是一种炎症相关疾病的候选药物.