基质金属蛋白-9抑制剂阻断视网膜色素上皮细胞表面CD73脱落防治实验性自身免疫性葡萄膜炎的初步研究

• 作者: 周树民 孔繁强 陈松
• 来源期刊: 中华眼底病杂志
• 关键词: 基质金属蛋白酶9/拮抗剂和抑制剂 5'-核苷酸酶 视网膜色素上皮 细胞,培养的 葡萄膜炎/病理生理学 动物实验
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 289-294
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn511434-20190428-00161

摘要

目的 初步探讨MMP-9抑制剂阻断RPE细胞表面CD73脱落,防治实验性自身免疫葡萄膜炎(EAU)的机制.方法 体外培养分离自野生型C57BL/6小鼠及CD73基因敲除(CD73-/-)小鼠的RPE细胞,以脂多糖及TNF-α共同干预,诱导RPE表面CD73脱落.依据是否同时加入MMP-9抑制剂CTK8G 1150(终浓度5.0 μmol/L),将两种小鼠培养的RPE细胞分别设为MMP-9抑制剂干预组及无干预对照组.每组细胞给予溶媒、1 μmol/L单磷酸腺苷(AMP)、1 μmol/L AMP及3μmol/L 5'-α,β-亚甲基-二磷酸腺苷(APCP)(AMP+APCP)进行干预.氚化胸苷掺入法检测不同组别RPE细胞对CD4+T细胞增生的刺激作用.分别以野生型B6小鼠及CD73-/-小鼠为受体,过继免疫诱发EAU.受体小鼠分别随机分为MMP-9抑制剂干预组及未干预对照组,于过继免疫后4、7、10d视网膜下腔分别注射CTK8G1150或溶媒.实时定量PCR (RT-PCR)、Western blot法检测受体小鼠RPE细胞中CD73 mRNA及蛋白表达.组间比较采用单因素方差分析.结果 刺激方式为AMP时,C57BL/6 MMP-9抑制剂干预组CD4+T细胞的增生能力较无干预组显著下降,差异有统计学意义(F=13.28,P＜0.01);溶媒、AMP+APCP时,两组CD4+T细胞增生能力比较,差异无统计学意义(F=7.78、6.58,P＞0.05).CD73-/-MMP-9抑制剂干预组、无干预组不同刺激方式CD4+T细胞增生能力比较,差异均无统计学意义(F=5.24、6.12、7.04,P＞0.05).RT-PCR检测结果显示,B6受体小鼠MMP-9抑制剂组、无干预对照组RPE细胞中CD73 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(F=6.54,P＞0.05).Western blot检测结果显示,B6受体小鼠MMP-9抑制剂组RPE细胞中CD73蛋白表达较未干预对照组显著增加,差异有统计学意义(F=15.24,P＜0.01).结论 MMP-9抑制剂阻断RPE细胞表面CD73的脱落对EAU具有保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈松	天津医科大学总医院眼科	48	286	9.0	14.0
2	孔繁强	天津医科大学总医院检验科	7	15	3.0	3.0
3	周树民	天津医科大学第二医院检验科	12	16	3.0	3.0