微RNA-195-5p对乳腺癌细胞生长、迁移和侵袭的影响

• 作者: 万群 唐敏 孙子久 孙恃雷 张彦 方玉婷 胡静
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺肿瘤 微RNAs 上皮-间质转化 细胞运动 Hippo-YAP信号通路
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 122-132
• 页数: 11页
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2020.11.778

摘要

目的:探讨上调或下调微RNA (microRNA,miRNA,miR)-195-5p对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231和BT-549细胞增殖、迁移和侵袭的影响,及可能的作用机制.方法:应用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分析miR-195-5p在乳腺癌中的表达水平.将miR-195-5p-模拟物(mimics)转入MDA-MB-231细胞构建外源性miR-195-5p高表达的重组细胞,同时将miR-195-5p-抑制剂(inhibitor)转入BT-549细胞构建沉默内源性miR-195-5p表达的重组细胞.实时荧光定量PCR法检测重组细胞中miR-195-5p的表达水平;MTT法检测细胞的增殖能力;划痕愈合实验及Transwell小室法分别检测细胞的横向、纵向迁移能力及侵袭能力;实时荧光定量PCR法检测上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、转录因子Snail和波形蛋白(vimentin)及迁移相关因子yes相关蛋白1 (yes-associated protein-1,YAP-1)mRNA的表达水平;蛋白质印迹法检测EMT相关标志物锌指蛋白E盒结合同源异形盒1(zinc finger E-box binding homeobox 1,ZEB1)、E-cadherin、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和vimentin以及迁移相关标志物YAP-1和磷酸化YAP-1蛋白的表达水平.结果:miR-195-5p在乳腺癌中的表达水平低.MDA-MB-231/mimics细胞中miR-195-5p的表达水平明显上调(P＜0.001),BT-549/inhibitor细胞中miR-195-5p的表达水平显著下调(P＜0.001).miR-195-5p表达上调后MDA-MB-231/mimics细胞的增殖能力明显减弱(P＜0.001),miR-195-5p表达下调后BT-549/inhibitor细胞的增殖能力明显增强(P＜0.05);MDA-MB-231/mimics细胞的横向和纵向迁移及侵袭能力均被明显抑制(P值均＜0.05),BT-549/inhibitor细胞的横向和及纵向迁移能力及侵袭能力均被明显提高(P值均＜0.05).实时荧光定量PCR法显示,MDA-MB-231/mimics细胞中上皮细胞标志物E-cadherin mRNA表达水平明显升高(P＜0.05),而间质细胞标志物vimentin和N-cadherin mRNA的表达水平则显著下调(P＜0.05);蛋白质印迹法检测结果显示,MDA-MB-231/mimics细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P＜0.001),而vimentin (P＜0.05)、N-cadherin (P＜0.01)和ZEB1 (P＜0.05)蛋白的表达水平则明显降低,提示EMT过程可能被抑制;MDA-MB-231/mimics细胞中迁移相关标志物YAP-1及其磷酸化蛋白的表达水平均明显下调(P＜0.05和P＜0.01).结论:miR-195-5p能抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭、迁移和EMT的发生,该过程可能与Hippo-YAP信号通路的抑制相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐敏		52	139	6.0	8.0
2	张彦		74	756	14.0	26.0
3	胡静		8	76	4.0	8.0
4	孙恃雷		3	0	0.0	0.0
5	万群		3	0	0.0	0.0
6	孙子久		1	0	0.0	0.0
7	方玉婷		1	0	0.0	0.0