基于CRISPR/Cas蛋白的副溶血弧菌检测方法的研究

• 作者: 李哲 王紫鉴 王群 赵宏群 赵林 逄波 阚飙
• 来源期刊: 疾病监测
• 学科: 医学
• 关键词: 规律间隔性成簇短回文重复序列 Cas12a 副溶血弧菌 分子检测
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 传染病监测
• 页码范围: 513-517
• 页数: 5页
• 分类号: R378
• 语种: 中文
• DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2020.06.012

摘要

目的 利用规律间隔性成簇短回文重复序列(CRISPR)免疫原理及Cas 12a酶的特点构建一种快速检测副溶血弧菌(VP)的方法,实现对病原菌准确快速的检测和识别.方法 本研究通过制备纯化Cas12a蛋白,筛选构建VP的gRNA,建立CRISPR-VP荧光检测系统,根据最终荧光扩增曲线判定CRISPR-VP检测方法的有效性.结果 在CRISPR-VP检测方法中只在VP的序列存在时才会产生明显的荧光信号.结论 本实验初步建立了基于CRISPR/Cas蛋白的VP的检测方法,为后续简易检测试剂的研制提供理论依据.