何首乌提取液对衰老小鼠脑组织DNA甲基化和基因转录的影响

• 作者: 徐林 杨江权 范芳 葛正龙 邹佳益
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 何首乌 衰老 甲基化 转录组
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 神经科学
• 页码范围: 9-17
• 页数: 9页
• 分类号: R282.71|R285.5|R339.38
• 语种: 中文
• DOI: 10.16016/j.1000-5404.201908210

摘要

目的 分析何首乌提取液(Polygonum multiflorum extract,PME)对D-半乳糖致衰老C57BL/6小鼠脑组织DNA甲基化和转录组水平的影响,探讨何首乌延缓衰老的作用机制.方法 50只C57BL/6小鼠分为5组:正常对照组(CC)、衰老组(MC)、PME高剂量组(MH)、中剂量组(MM)及低剂量组(ML);除CC组外,其余4组用D-半乳糖诱导建立衰老模型,60 d后MH组、MM组及ML组分别以1、0.6、0.3g·mL-1 ·kg-1的PME灌胃60 d,CC组及MC组灌胃等体积生理盐水.各组处理好后,麻醉小鼠并摘除眼球取血,通过检测血清中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性判断衰老模型建立及何首乌延缓小鼠衰老的作用;采用简化甲基化测序(reduced representation bisulfite sequencing,RRBS)和RNA-seq测序方法检测各组小鼠脑组织DNA甲基化水平和转录水平,并利用生物信息学方法分析各组样本间差异性甲基化区域(differentially methylated region,DMR)以及差异表达基因,对DMR位于启动子区的相关基因进行GO聚类及KEGG通路分析,并通过实时荧光定量PCR验证部分基因的表达.结果 与CC组比较,MC组中SOD、GSH-Px活性明显下降(P＜0.05),MDA含量明显升高(P＜0.05);PME作用后,衰老小鼠中抗氧化酶活性及MDA含量均明显缓解,以MM组较为明显(P＜0.05).在DNA甲基化测序中发现,CC组与MC组间及MC组与MM组间均发生甲基化变化的DMR位于启动子区的相关基因有52个,其中有7个基因的甲基化水平与转录组结果呈负相关,包括与衰老相关的Synpo和Mapkapk5;13个基因的甲基化水平与转录组呈正相关,包括与衰老相关的Tcf7和Rab15;且这4个基因mRNA水平均与转录组测序结果一致.结论 何首乌提取液可能通过调控衰老小鼠中Synpo、Mapkapk5、Tcf7和Rab15基因甲基化水平,进而调节其转录水平,发挥延缓小鼠衰老的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐林	遵义医科大学生物化学与分子生物学教研室	7	0	0.0	0.0
2	葛正龙	遵义医科大学生物化学与分子生物学教研室	4	0	0.0	0.0
3	范芳	遵义医科大学生物化学与分子生物学教研室	7	2	1.0	1.0
4	邹佳益	遵义医科大学生物化学与分子生物学教研室	1	0	0.0	0.0
5	杨江权	遵义医科大学生物化学与分子生物学教研室	1	0	0.0	0.0