微小RNA-374-5 p对大鼠垂体泌乳素腺瘤细胞系MMQ增殖、凋亡、侵袭的影响及其机制

• 作者: 李振业 王大维 高华
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 微小RNA 微小RNA-374-5p MMQ细胞 泌乳素腺瘤 垂体肿瘤转化基因 细胞增殖 细胞凋亡 E-钙黏蛋白 N-钙黏蛋白
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: R736.4
• 字数: 3873字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2020.09.001

摘要

目的 观察微小RNA-374-5p(miR-374-5p)对大鼠垂体泌乳素腺瘤细胞系MMQ增殖、凋亡、侵袭的影响,并探讨其作用机制.方法 将对数生长期MMQ细胞分为A、B、C、D组.A组加入常规培养基,B组加入miR-374-5p类似物,C组加入miR-374-5p抑制剂,D组加入miR-374-5p类似物和miR-374-5p抑制剂.各组培养0、24、48、72 h时,酶标仪在490 nm波长处检测各组细胞光密度值(OD值,以OD值表示细胞增殖能力).各组细胞培养72 h时,离心收集细胞,加入Annexin V-FITC和PI染色,流式细胞仪检测Annexin V染色阳性细胞百分数和PI染色阳性细胞百分数(以Annexin V染色阳性细胞百分数和PI染色阳性细胞百分数表示细胞凋亡能力).各组细胞培养72 h时,采用实时定量PCR法检测各组细胞侵袭相关基因[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、蜗牛家族转录阻遏物1(Snail)、波形蛋白(Vim-entin),以侵袭相关基因mRNA的相对表达量表示细胞侵袭能力]及垂体肿瘤转化基因(PTTG)mRNA.将野生型(WT)PTTG荧光素酶载体和突变型(mut)PTTG荧光素酶载体分别与microRNA-NC或miR-374-5p类似物共转染至MMQ细胞,记为NC-WT组、NC-mut组、WT组、mut组,转染72 h后,使用双荧光素酶报告基因检测系统检测细胞上清液中荧光素酶活性.结果 与A、D组相比,培养24、48、72 h时,B组细胞增殖能力显著降低(P均<0.05),C组细胞增殖能力显著升高(P均<0.05).A、B、C、D组Annexin V染色阳性细胞百分数分别为3.7％ ±1.4％、17.6％±5.3％、3.4％ ±1.5％、4.5％ ±1.4％,PI染色阳性细胞百分数分别为2.4％ ±0.9％、11.2％ ±3.7％、2.5％ ±1.2％、2.7％ ±0.9％,其中B组Annexin V染色阳性细胞百分数和PI染色阳性细胞百分数与A、C、D组相比,P均<0.05.与A、D组相比,B组细胞E-cadherin mRNA、PTTG mRNA相对表达量显著降低(P均<0.05),N-cadherin mRNA相对表达量显著升高(P均<0.05).NC-WT组、NC-mut组、WT组、mut组荧光素酶活性分别为13.2±2.6、15.3±3.2、4.7±1.6、14.3±3.5,其中WT组荧光素酶活性与其他各组相比,P均<0.05.结论 miR-374-5p可抑制MMQ细胞增殖、诱导凋亡并抑制侵袭相关基因表达,PTTG是其调控靶基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高华		26	16	2.0	2.0
2	李振业		7	18	2.0	4.0
3	王大维		3	1	1.0	1.0