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Dhori病毒核蛋白基因的重组表达及其抗体制备
Dhori病毒核蛋白基因的重组表达及其抗体制备
作者:
丁军涛
刘希佳
刘振明
史深
孙素荣
张渝疆
沈姝
邓菲
阿布力米提·莫明
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
Dhori virus
核蛋白
原核表达
真核表达
多克隆抗体
摘要:
[目的]表达和纯化Dhori病毒(DHOV)核蛋白(NP),并制备多克隆抗体.[方法]RT-PCR扩增NP基因,并克隆至原核表达载体pET-28a和真核表达载体pcDNA3.1中.将重组质粒pET-28a-NP转化至大肠杆菌BL21中诱导表达,SDS-PAGE分析重组蛋白NP(rNP)的表达并亲和层析纯化rNP,以抗DHOV阳性羊血清检测其抗原性,免疫新西兰兔制备抗血清,以ELISA法检测其效价.将pcDNA3.1-NP转染至Vero细胞,以间接免疫荧光法评估抗体的结合活性,Western Blotting检测抗体与重组蛋白的特异性反应能力.[结果]pET-28a-NP和pcDNA3.1-NP重组质粒构建正确,原核表达的rNP约为55.3 kDa,并能被阳性羊血清识别,制备的抗体效价为1:409600,能特异性识别真核及原核表达产物.[结论]成功表达和纯化rNP,并制备了多克隆抗体,可用于深入研究DHOV核蛋白的生物学特性及其检测试剂.
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篇名
Dhori病毒核蛋白基因的重组表达及其抗体制备
来源期刊
生物技术
学科
生物学
关键词
Dhori virus
核蛋白
原核表达
真核表达
多克隆抗体
年,卷(期)
2020,(2)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
140-146
页数
7页
分类号
Q786
字数
语种
中文
DOI
10.16519/j.cnki.1004-311x.2020.02.0024
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核蛋白
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真核表达
多克隆抗体
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
生物技术
主办单位:
黑龙江省微生物学会
黑龙江省生物工程学会
黑龙江省科学院微生物研究所
出版周期:
双月刊
ISSN:
1004-311X
CN:
23-1319/Q
开本:
大16开
出版地:
哈尔滨市道里区兆麟街68号
邮发代号:
14-225
创刊时间:
1991
语种:
chi
出版文献量(篇)
3478
总下载数(次)
16
总被引数(次)
32198
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