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摘要:
应用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱联用法(UPLC-Q-Exactive)鉴定椴树蜂蜜蛋白经胰蛋白酶水解后获得的肽类物质的组成和结构,并探讨椴树蜂蜜酶解多肽与其抗氧化活性的关系.椴树蜂蜜经三氯乙酸溶液沉淀,所得蛋白用胰蛋白酶酶解,酶解肽段经C18固相萃取柱富集净化后,采用0.1%甲酸(A)-乙腈(B)作为流动相进行梯度洗脱,以高分辨质谱(Q-Exactive)的Full MS/ddMS2模式对其进行鉴定.采用MaxQuant软件分析质谱结果,所得肽段在Uniprot上进行Blast序列对比,共鉴定出52种椴树蜂蜜胰蛋白酶解多肽,其中71.15%来自蜂王浆主要蛋白(MRJPs),鉴定出的肽段归属于10种蛋白质,其中6种(60%)属于MRJ P家族蛋白.对椴树蜂蜜酶解多肽质谱鉴定结果进行重复性分析,2次以上重复质谱分析可实现对椴树蜂蜜多肽(87.1%)的可靠鉴定.结合文献报道的蜂蜜多肽抗氧化活性的构效关系,筛选出11条可能具有抗氧化活性的多肽.化学合成11条多肽后,进行4种不同的抗氧化活性实验.结果表明,这11条多肽的抗氧化活性存在较大差异,其中1 g/L VIYEWK多肽显示出较强的ABTS自由基清除活性(33.8%±0.6%)、DPPH自由基清除活性(96.5%±0.0%),并表现出一定的还原力(0.010±0.001)和Fe2+螯合活性(4.0%±0.2%).该方法能快速有效鉴定椴树蜂蜜多肽结构,可为揭示椴树蜂蜜多肽结构与抗氧化活性的关系提供依据.
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文献信息
篇名 超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱联用鉴定椴树蜂蜜中的抗氧化活性肽
来源期刊 质谱学报 学科 化学
关键词 多肽 椴树蜂蜜 超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive) 抗氧化活性
年,卷(期) 2020,(3) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 244-253
页数 10页 分类号 O657.63
字数 5910字 语种 中文
DOI 10.7538/zpxb.2019.0009
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 傅红 福州大学生物科学与工程学院 37 211 8.0 13.0
5 谢博 福州大学生物科学与工程学院 2 0 0.0 0.0
21 杨方 2 0 0.0 0.0
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多肽
椴树蜂蜜
超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive)
抗氧化活性
研究起点
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期刊影响力
质谱学报
双月刊
1004-2997
11-2979/TH
大16开
北京275信箱65分箱中国原子能科学研究院
82-349
1980
chi
出版文献量(篇)
1837
总下载数(次)
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12922
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