PDPK13′UTR双荧光素酶报告载体的构建及与gga-miR-148a-5p的靶向验证

• 作者: 何启牮 余河玲 朱师良 王彦
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: PDPK1 gga-miR-148a-5p 禽白血病 双荧光素酶报告基因检测系统
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医?水产养殖
• 页码范围: 147-151
• 页数: 5页
• 分类号: Q783
• 字数: 3755字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2020.01.020

摘要

本试验通过构建PDPK1基因3′UTR双荧光素酶报告载体,并验证gga-miR-148a-5p与PDPK1的靶向关系.利用生物信息学软件预测gga-miR-148a-5p与PDPK1结合位点;利用PCR扩增PDPK1基因3′UTR序列,将其克隆到PGL3-CMV-LUC-MCS双荧光素酶报告基因载体中;将gga-miR-148a-5p及阴性对照分别与野生型gga-PDPK1-WT-3′UTR双荧光素酶报告质粒共转染至293T细胞中,双荧光素酶报告系统检测各组荧光素酶活性.Targetscan、miRbase数据库预测结果显示,gga-miR-148a-5p与PDPK1基因3′UTR存在互补结合位点;酶切及测序结果表明,双荧光素酶报告载体构建成功;荧光素酶活性试验结果表明,gga-miR-148a-5p mimics能够与PDPK1基因3′UTR结合并抑制荧光素酶活性.gga-miR-148a-5p能够与PDPK1靶向性结合,PDPK1是gga-miR-148a-5p的靶基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王彦	四川农业大学畜禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室	22	158	7.0	12.0
2	余河玲	四川农业大学畜禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室	1	0	0.0	0.0
3	朱师良	四川农业大学畜禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室	1	0	0.0	0.0
4	何启牮	四川农业大学畜禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室	1	0	0.0	0.0