长链非编码RNA LINC00886在胃贲门腺癌中的表达及其对胃癌细胞生物学行为的影响

• 作者: 李晓青 杨柳 牛云峰 董稚明 郭炜
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 胃肿瘤 RNA,长链非编码 细胞增殖 细胞运动 上皮-间质转化
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 172-184
• 页数: 13页
• 分类号: R735.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2020.11.814

摘要

目的:检测长链非编码RNA (long non-coding RNAs,LncRNAs)LINC00886在胃贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)组织及人胃癌细胞系中的表达及其对胃癌细胞体外增殖、迁移及侵袭等生物学行为的影响,并探讨其与上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)进程的相关性.方法:应用实时荧光定量PCR法检测LINC00886在GCA组织及其相应癌旁正常组织及人胃癌细胞系中的表达情况.采用脂质体法将携带有LINC00886的重组质粒pcDNA3.1-LINC00886转入胃癌SGC-7901和BGC-823细胞,用实时荧光定量PCR法检测转染效率.随后,采用MTS法和平板克隆形成实验、划痕愈合实验和Transwell小室迁移实验、Transwell小室侵袭实验分别检测LINC00886过表达对人胃癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测pcDNA3.1-LINC00886转入SGC-7901和BGC-823细胞后EMT相关标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)与波形蛋白(vimentin)mRNA和蛋白表达水平的变化.结果:在GCA组织中LINC00886的表达水平明显低于癌旁正常组织(P＜0.01),且与肿瘤的TNM分期相关(P＜0.05).LINC00886在胃癌细胞中的表达均低于对照组(P值均＜0.01).与对照组相比,转染pcDNA3.1-LINC00886质粒的SGC-7901和BGC-823细胞中LINC00886的表达水平均明显上调(P＜0.05或P＜0.01);LINC00886过表达可抑制SGC-7901和BGC-823细胞的体外增殖能力(P值均＜0.01);划痕愈合实验检测结果显示,LINC00886过表达后SGC-7901细胞的横向迁移能力受到抑制(P＜0.05),但BGC-823细胞的横向迁移能力无变化(P＞0.05);Transwell小室迁移实验检测结果显示,LINC00886过表达能抑制SGC-7901及BGC-823细胞的纵向迁移能力(P＜0.05和P＜0.01).过表达LINC00886可上调SGC-7901和BGC-823细胞中E-cadherin mRNA(P＜0.05和P＜0.01)和蛋白的表达水平,降低N-cadherin和vimentinmRNA (P＜0.05或P＜0.01)和蛋白的表达水平.结论:LINC00886低表达可能与胃贲门腺癌的发生和发展相关.LINC00886过表达可以抑制胃癌细胞的体外增殖、迁移与侵袭能力,且可能参与EMT进程.