抑瘤素M对人脐带间充质干细胞增殖和成骨分化的影响

• 作者: 周余来 孔宁 孙忠平 张璐 石毅 石艳 邹颖刚
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 抑瘤素M 脐带间充质干细胞 成骨 细胞增殖 细胞分化
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 699-706
• 页数: 8页
• 分类号: Q78
• 字数: 4963字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200406

摘要

目的:探讨抑瘤素M (OSM)对体外培养的人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)增殖及成骨分化的影响,阐明OSM是一种有效的成骨诱导活性因子.方法:体外培养hUCMSCs,流式细胞术检测第3代hUCMSCs表面标志物;CCK-8法测定不同剂量(0.1、1.0和10.0 μg·L-1)重组人抑瘤素M (rhOSM)处理后hUCMSCs的增殖活性.将hUCMSCs分为对照组、经典成骨诱导剂组和不同剂量(0.1、1.0和10.0 μg·L-1)rhOSM组,于成骨诱导第4、7和14天,采用BCIP/NBT法进行碱性磷酸酶(ALP)染色并定量检测细胞中ALP活性,茜素红染色法检测钙结节的生成情况并半定量分析细胞矿化活性,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测hUCMSCs中Runt相关转录因子2(Runx2)和OCN mRNA表达水平.结果:hUCMSCs符合间充质干细胞(MSCs)鉴定标准.rhOSM处理hUCMSCs 72 h,与对照组比较,10.0μg·L-1 rhOSM组细胞增殖活性明显降低(P＜0.05);处理96 h,与对照组比较,各剂量rhOSM组细胞增殖活性均明显降低(P＜0.05),且各剂量rhOSM组组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).成骨诱导第4、7和14天,与经典成骨诱导剂组比较,各剂量rhOSM组细胞中ALP活性和Runx2 mRNA表达水平均明显升高(P＜0.05);与0.1 μg·L-1 rhOSM组比较,1.0和10.0 μg·L-1 rhOSM组ALP活性和Runx2 mRNA表达水平明显升高(P＜0.05);与成骨诱导第7天比较,诱导第14天各剂量rhOSM组细胞中ALP活性和Runx2 mRNA表达水平略降低,但差异无统计学意义(P＞0.05).成骨诱导第7、14和21天,与经典成骨诱导剂组比较,各剂量rhOSM组细胞矿化活性均明显升高(P＜0.01);与0.1μg·L-1 rhOSM组比较,1.0和10.0 μg·L-1 rhOSM组细胞矿化活性明显升高(P＜0.05).与经典成骨诱导组比较,各剂量rhOSM组OCN mRNA表达水平均明显升高(P＜0.05);成骨诱导第7、14和21天,与0.1 μg·L-1 rhOSM组比较,1.0和10.0 μg·L-1 rhOSM组细胞中OCN mRNA表达水平明显升高(P＜0.05),具有时间-剂量依赖性.结论:rhOSM通过上调Runx2和OCN的表达及增加成骨细胞ALP的活性和钙盐沉积促进hUCMSCs体外成骨分化,是一种有效的成骨诱导活性因子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周余来	吉林大学药学院医用生物材料学教研室	72	253	8.0	11.0
2	邹颖刚	吉林大学第二医院妇产科生殖中心	40	138	7.0	9.0
3	石毅	吉林大学药学院生物工程实验中心	30	102	6.0	9.0
4	孔宁	吉林大学药学院医用生物材料学教研室	17	31	2.0	3.0
5	石艳	吉林大学药学院实验药理与毒理学教研室	44	191	8.0	11.0
6	张璐		3	9	1.0	3.0
7	孙忠平	吉林大学药学院医用生物材料学教研室	1	0	0.0	0.0