卵形鲳鲹JAK3蛋白的原核表达与纯化

• 作者: 杨萌 段家文 谢业扬 陆专灵 韦友传 高爽爽
• 来源期刊: 广东农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 卵形鲳鲹 JAK3蛋白 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 137-142
• 页数: 6页
• 分类号: S913
• 字数: 5229字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16768/j.issn.1004-874X.2020.01.019

摘要

[目的]纯化获取卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)JAK3(TroJAK3)重组蛋白,为了解TroJAK3蛋白功能、相互作用及抗体制备奠定基础.[方法]应用分子生物学技术构建重组质粒pET-32a-TroJAK3,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot检测TroJAK3重组蛋白表达情况.[结果]PCR扩增片段长度为3 333 bp,经双酶切鉴定、测序确认序列和开放阅读框正确,结果显示成功构建重组质粒pET-32a-TroJAK3.经终浓度为1 mmol/L IPTG 37℃诱导4 h后进行SDS-PAGE检测,结果表明TroJAK3重组蛋白以包涵体形式大量表达,分子量约为140 ku.经Ni-IDA树脂柱纯化,获得纯化的重组蛋白.Western blot检测结果显示有140 ku的条带,表明TroJAK3重组蛋白能被抗His抗体识别.[结论]成功构建了重组质粒pET-32a-TroJAK3,纯化得到高纯度的TroJAK3融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韦友传	广西大学动物科学技术学院	15	133	6.0	11.0
2	杨萌	广西大学动物科学技术学院	2	3	1.0	1.0
3	高爽爽	广西大学动物科学技术学院	2	0	0.0	0.0
4	谢业扬	广西大学动物科学技术学院	2	1	1.0	1.0
5	段家文	广西大学动物科学技术学院	1	0	0.0	0.0