摘要:
目的 探讨蛋氨酸脑啡肽(methionine enkephalin,MENK)对未活化人外周血淋巴细胞阿片受体表达和细胞增殖的影响.方法 无菌分离5名健康志愿者人外周血淋巴细胞,将取得细胞平均随机分为对照组和MENK组,MENK组在1×10-12 mol/L MENK下培养48 h,对照组在RPMI1640培养基中行相同时间培养.实时定量PCR检测阿片受体μ和阿片生长受体(opioid growth factor receptor,OGFr)mRNA表达变化,Western blot检测组间OGFr蛋白表达变化.使用MENK以1×10-3、1×10-6、1×10-8、1×10-10、1×10-12和1×10-14mol/L作用于未活化人外周血淋巴细胞24、48、72、96 h,CCK-8检测不同MENK浓度下淋巴细胞增殖情况.结果 1×10-12mol/L MENK刺激未活化人外周血淋巴细胞可显著上调阿片受体μ[(1.257±0.078)比(1.000±0.000),t=3.289,P<0.05]和OGFr[(2.787±0.494)比(1.000±0.000),t=3.618,P<0.05] mRNA表达,并增加OGFr蛋白表达[(2.174±0.281)比(1.000±0.000),t =4.183,P<0.05]. 48 h时1×10-8 mol/L[(1.220±0.090)比(1.000±0.000),t=2.455 ,P< 0.05]、1×10-10 mol/L[(1.220±0.089)比(1.000±0.000),t=2.480,P<0.05]、1×10-12 mol/L[(1.174±0.060)比(1.000±0.000),t=2.904,P<0.05] MENK组均可显著刺激未活化人外周血淋巴细胞增殖;72 h时1×10-3 mol/L[(0.839±0.039)比(1.000±0.000),t=4.152,P<0.05)]、1 ×10-12 mol/L[(0.878±0.023)比(1.000±0.000),t=5.247,P <0.05]、1×10-14 mol/L[(0.919±0.027)比(1.000±0.000),t=2.997,P<0.05] MENK组对未活化人外周血淋巴细胞增殖有显著抑制作用.结论 单独低浓度MENK刺激可对未活化人外周血淋巴细胞上阿片受体μ和OGFr表达产生调节作用;不同浓度MENK在不同时间下对未活化人外周血淋巴细胞增殖产生调节作用不同.