复方扶芳藤合剂含药血清对大鼠体外模拟"造血龛"中造血干细胞增殖的影响

• 作者: 万娟 周倍伊 周围 杨力强 罗眈 谢金玲 钟卫干 黄铠琴
• 来源期刊: 广西中医药
• 学科: 医学
• 关键词: 复方扶芳藤合剂 造血干细胞 骨髓间充质干细胞 造血龛 干细胞增殖
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 63-68
• 页数: 6页
• 分类号: R285.5
• 字数: 4921字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-0719.2020.01.024

摘要

目的:通过体外共培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)和造血干细胞(HSC)模拟"造血龛",观察BMSCs+HSC Transwell共培养和BMSCs+HSC接触共培养模拟的"造血龛"中BMSCs对HSC生长的影响;将复方扶芳藤合剂含药血清及空白血清加入模拟的"造血龛"中,观察药物对HSC生长的影响.方法:采用全骨髓贴壁法体外培养SD雄性大鼠骨髓间充质干细胞至P3代,流式细胞仪检测其表面标志物,进行BMSCs鉴定.用MACS磁珠分选仪分选SD大鼠骨髓CD90.1+细胞(造血干细胞),流式细胞仪检测其表面标志物,进行HSC鉴定.将BMSCs和HSC共培养:Transwell共培养组(上室接种HSC、下室接种BMSCs),2D接触共培养组(在24孔板同时接种HSC与BMSCs),均连续培养7 d,期间每隔两天使用荧光显微镜观察"龛"中HSC的形态及细胞数量,使用CCK-8法检测"龛"中HSC吸光度值,绘制生长曲线;采用20％浓度的复方扶芳藤合剂含药血清和空白血清连续7 d对各组"龛"中干细胞进行干预,期间每隔两天用使用荧光显微镜观察各组"龛"中HSC的形态及细胞数量,CCK-8法检测各组"龛"中HSC吸光度值,绘制生长曲线,对比各组生长曲线的变化,分析各组"龛"中HSC生长情况.结果:BMSCs具有典型的成纤维样细胞形态,集落生长呈漩涡状.P3代BMSCs表型CD29、CD44、CD34、CD45表达分别为99.709％、99.734％、0.114％、0.013％.HSC在荧光显微镜下激发呈绿色荧光的均一圆形.HSC荧光显微镜下观测及生长曲线显示:各组"龛"中HSC数量均随着培养时间的增加而增加(P<0.05);自第5 d起,Transwell共培养组、2D接触共培养组的HSC吸光度值高于HSC单独培养组(P<0.05);含药血清Transwell共培养组的HSC吸光度值高于空白血清Transwell共培养组(P<0.05),含药血清2D接触共培养组HSC吸光度值高于Transwell共培养组(P<0.05).结论:全骨髓贴壁法分离培养的BMSCs具有间充质干细胞的生物学特性.MACS磁珠分选可快速获得高纯度HSC;与单独培养的HSC组相比,Transwell共培养模拟"龛"组、2D接触共培养模拟"龛"组内的BMSCs均能促进HSC增殖,2D接触共培养组更为明显;复方扶芳藤合剂含药血清能进一步增强模拟"龛"中BMSCs促进HSC增殖能力,对2D接触共培养组促HSC增殖强度比对Transwell共培养组更为明显.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钟卫干	广西中医药大学基础医学院	22	124	6.0	10.0
2	杨力强	广西中医药大学基础医学院	69	280	9.0	13.0
3	罗眈	广西中医药大学基础医学院	21	43	4.0	6.0
4	周倍伊	广西中医药大学基础医学院	13	49	4.0	7.0
5	万娟	广西中医药大学基础医学院	4	3	1.0	1.0
6	周围	广西中医药大学药学院	3	0	0.0	0.0
7	谢金玲	广西中医药大学广西中药药效研究重点实验室	8	17	2.0	4.0