Eg犬粪抗原与多克隆抗体结合的条件筛选与纯化

• 作者: 乌云花 吴小霞 布于其其格 张壮志 徐晶 段兰利 王冰洁 王方 班万里 穆尼拉?特列吾汗 艾沙江 赵莉 郭涛 陈云英
• 来源期刊: 草食家畜
• 关键词: 细粒棘球绦虫 棘球蚴 抗原抗体结合物
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 动物医学
• 页码范围: 39-50
• 页数: 12页
• 分类号: S858
• 语种: 中文
• DOI: 10.16863/j.cnki.1003-6377.2020.03.007

摘要

包虫病又称棘球蚴病,此病是由细粒棘球绦虫引起的一类严重的人兽共患寄生虫病,它严重危害人类与家畜的健康,并对畜牧业造成危害与阻碍.了解终末宿主犬科动物粪样中细粒棘球绦虫虫体蛋白组成,寻找特异性的靶抗原能对包虫病的预防和提高双抗夹心ELISA检测的敏感性与特异性提供重要依据.本文通过对缓冲溶液的筛选,多克隆血清与粪抗原结合条件的筛选,确定抗体与抗原结合最佳配比浓度,用亲和层析与凝胶层析对抗原抗体结合物纯化分离,并检测纯化后样品的敏感性和特异性.最终确定PBST和柠檬酸缓冲液都能用于溶解犬粪中细粒棘球绦虫可溶性抗原,且抗原抗体最佳结合浓度选用溶液体积不变情况下,多克隆血清占比20％与粪抗原结合.抗原抗体结合物通过凝胶层析柱在A峰(45.5～50.5 min附近)接收的样品中含有纯化的抗原抗体结合物.本研究的结果与方法可以为以后筛选鉴定靶抗原,提高粪抗原ELISA检测试剂盒的敏感性与特异性提供重要依据.