选择性siRNA干扰FCGRⅡA影响THP-1吞噬调理红细胞

• 作者: 叶璐夷 张嘉敏 朱自严 李勤 杨启修 杨颖 赵俸涌
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: THP-1 FCGRⅡA 小干扰RNA 单核细胞单层实验 吞噬
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 107-114
• 页数: 8页
• 分类号: R392.12
• 语种: 中文

摘要

为探讨能否通过小于扰RNA(small interference RNA,siRNA)干扰影响巨噬细胞Fcγ受体介导的吞噬作用,采用FCGRⅡA siRNA转染佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)活化人单核细胞THP-1,并设NO-TARGET、GAPDH、no-siRNA(1640)为对照.培养48～ 72 h后,用FCM分析CD14+细胞的CD32、CD32b分布,用CD14的平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)值作为内参,得到CD32、CD32b相对MFI值;用Western blotting观察CD32a、CD32b的蛋白表达水平;进行单核细胞单层实验(monocyte monolayer assay,MMA),结合流式细胞术分析THP-1中能吞噬调理红细胞的吞噬百分比.采用配对t检验分析FCGRⅡA组与各对照组间的分布差异.Western blotting结果证实,FCGRⅡA组CD32a量明显减少(分别为NO-TARGET组、GAPDH组、1640组的22％、42％、31％),而CD32b不降低;FCM分析显示,FCGRⅡA组MFI CD32/CD14较NO-TARGET组、1640组、GAPDH组下降(P＜0.05),而CD32b无明显减少;同时MMA结果显示,FCGRⅡA组吞噬细胞占比分别比NO-TARGET组、GAPDH组、1640组减少9.6％、9.2％和4.4％.提示siRNA选择性干扰可有效降低Fcγ受体CD32a表达,并降低PMA活化的THP-1吞噬能力,可作为潜在手段干扰输血反应所涉及的巨噬细胞吞噬作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张嘉敏		23	146	5.0	11.0
2	朱自严		81	565	14.0	21.0
3	杨颖		22	144	5.0	11.0
4	杨启修		9	8	2.0	2.0
5	李勤		24	41	3.0	5.0
6	赵俸涌		11	6	2.0	2.0
7	叶璐夷		11	65	3.0	8.0