脉管Ⅱ号胶囊对Ang-1/Tie2信号通路及人脐静脉内皮细胞的影响

• 作者: 张美吉 杨尾莲 林欣欣 王世军 陈福伟
• 来源期刊: 中国烧伤创疡杂志
• 关键词: 脉管Ⅱ号胶囊 人脐静脉内皮细胞 Ang-1/Tie2信号通路 血管新生 细胞活力 凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 体表溃疡研究与治疗
• 页码范围: 15-21
• 页数: 7页
• 字数: 4733字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-0726.2020.01.003

摘要

目的 研究脉管Ⅱ号胶囊对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的影响,探索其促进血管生成的可能机制.方法 按照随机数表法将20只SPF级雌性SD大鼠随机分为高剂量血清组与低剂量血清组,每组10只,分别以90 mg·kg-1·d-1与30 mg·kg-1·d-1的剂量喂服脉管Ⅱ号胶囊,用于制备含药血清;将HUVECs随机分为空白组、空载组、低剂量组、低剂量+Ang-1干扰组、高剂量组及高剂量+Ang-1干扰组,其中空白组与空载组HUVECs置于含有10％胎牛血清、1％丙酮酸钠、0.1 mg/mL肝素和0.05 mg/mL血管内皮生长因子的F12K培养基内,并分别接种于96孔培养板中放在37℃、5％CO2环境内培养,每3 d更换1次培养基,待HUVECs培养至融合度达到60％ ～80％时,按每孔102μL将空载质粒转染液加入空载组培养板中,充分混匀,放回培养箱中培养4 h,去上清,再加入完全培养基,在37℃、5％CO2环境内继续培养;低剂量组与低剂量+Ang-1干扰组HUVECs培养时将空白组培养环境中的10％胎牛血清替换为10％低剂量含药血清(取自低剂量血清组大鼠),并于相同时间加入Ang-1-pReceiver-M98转染液培养;高剂量组与高剂量+Ang-1干扰组HUVECs培养时将空白组培养环境中的10％胎牛血清替换为10％高剂量含药血清(取自高剂量血清组大鼠),并于相同时间加入Ang-1-pReceiver-M98转染液培养.分别用MTT法检测HUVECs的增殖情况,Hoechst33258染色法观察HUVECs形态,Elisa法及Western blotting法检测血管生成素1(angiopoietin-1,Ang-1)和酪氨酸激酶受体2(tyrosine kinase receptors2,Tie2)的表达水平.结果 与空白组对比,空载组HUVECs的相对增殖率及Ang-1、Tie2表达水平均无明显变化(P均>0.05);高剂量组和低剂量组HUVECs的相对增殖率及Ang-1、Tie2表达水平均显著增加(P均<0.05),且高剂量组显著高于低剂量组(P均<0.05);高剂量+Ang-1干扰组和低剂量+Ang-1干扰组HUVECs的增殖率及Ang-1、Tie2表达水平均显著降低(P均<0.05),且低剂量+Ang-1干扰组显著低于高剂量+Ang-1干扰组(P均<0.05).空白组、空载组、高剂量组和低剂量组细胞均维持原有形态,细胞凋亡和细胞形态变化较少;高剂量+Ang-1干扰组和低剂量+Ang-1干扰组细胞凋亡增加,且以低剂量+Ang-1干扰组细胞凋亡数量较大.结论 调节Ang-1/Tie2信号通路的表达可能是脉管Ⅱ号胶囊促进血管生成的作用机制,有待进一步深入研究证实.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨尾莲	福建中医药大学附属人民医院中医外科	6	1	1.0	1.0
2	王世军	福建中医药大学附属人民医院中医外科	17	55	5.0	7.0
3	陈福伟	福建中医药大学附属人民医院中医外科	3	1	1.0	1.0
4	张美吉	福建中医药大学附属人民医院中医外科	4	1	1.0	1.0